DB32-T 4578.4-2023 丙型病毒性肝炎防治技術指南 第4部分：實驗室建設與管理規范

江蘇省地方標準DB32/T4578.4—2023丙型病毒性肝炎防治技術指南第4部分：實驗室建設與管理規范TechnicalguidelinesforhepatitisCpreventionandcontrol—Part4：SpecificationsoflaboratoryconstructionandmanagementforhepatitisC發出布版2023-12-13發布發出布版江蘇省市場監督管理局ⅠDB32/T4578.4—2023前言 Ⅲ引言 Ⅳ 2規范性引用文件 3術語和定義 4縮略語 25開展檢測項目 26實驗室建設 7實驗室管理 48實驗室操作 49實驗室職業暴露預防和處置 參考文獻 DB32/T4578.4—2023Ⅲ本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規則》的規定起草。本文件是DB32/T4578《丙型病毒性肝炎防治技術指南》的第4部分。DB32/T4578已經發布了以下部分：——第1部分：質量控制指標；——第2部分：患者管理；——第3部分：職業暴露與處理；——第4部分：實驗室建設與管理規范；——第5部分：聚集性疫情處置。請注意本文件的某些內容可能涉及專利。本文件的發布機構不承擔識別專利的責任。本文件由江蘇省衛生健康委員會提出。本文件由江蘇省衛生標準化技術委員會歸口。本文件起草單位：江蘇省疾病預防控制中心、無錫市疾病預防控制中心、常州市疾病預防控制中心、連云港市疾病預防控制中心、淮安市疾病預防控制中心、南京市第二醫院。本文件主要起草人：周瑩、陳莉萍、徐曉琴、楊丹丹、盧靜、張之、胡海洋、肖勇、許曉國、楊煥森、楊鵬飛、管文輝、張永臣、孫琦、丁群一。ⅣDB32/T4578.4—2023引言丙型病毒性肝炎（簡稱丙肝）是全球性的嚴重威脅著人類健康的公共衛生問題，是引發肝硬化、肝細胞癌的重要病因之一。2021年國家衛生健康委牽頭印發了《關于印發消除丙型肝炎公共衛生危害行動工作方案（2021—2030年）的通知》，隨后江蘇省也印發了《關于印發江蘇省消除丙型肝炎公共衛生危害行動工作方案的通知》，以進一步推動丙型病毒性肝炎的防治工作。DB32/T4578《丙型病毒性肝炎防治技術指南》擬由以下五個部分構成：——第1部分：質量控制指標；——第2部分：患者管理；——第3部分：職業暴露與處理；——第4部分：實驗室建設與管理規范；——第5部分：聚集性疫情處置。DB32/T4578的制定是對丙肝防治工作相關方面的國家標準、行業標準的有力補充，為丙肝防治工作的患者篩查、診斷、報告、轉介、追蹤、治療、隨訪的全流程管理的科學防治提供支撐。為實現WHO“到2030年消除丙肝公共衛生危害”的目標有著重要的意義。DB32/T4578.4—20231丙型病毒性肝炎防治技術指南第4部分：實驗室建設與管理規范本文件給出規定了丙型病毒性肝炎（以下簡稱“丙肝”）實驗室開展的檢測項目、實驗室建設、實驗室管理、實驗室操作以及實驗室職業暴露預防與處置的指南。本文件適用于各級各類醫療衛生機構開展丙肝病毒檢測工作的實驗室。2規范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB19489實驗室生物安全通用要求GB50346生物安全實驗室建筑技術規范WS/T369醫療機構消毒技術規范ISO/IEC17025檢測和校準實驗室能力的通用要求（Generalrequirementsforthecompetenceof3術語和定義下列術語和定義適用于本文件。丙型肝炎病毒hepatitisCvirus；HCV屬于黃病毒科，肝炎病毒屬，其基因組為單股正鏈RNA，由9.6×103個核苷酸組成。注：HCV基因易變異，目前可至少分為6個基因型及多個亞型。HCV對一般化學消毒劑敏感，甲醛熏蒸等均可滅活丙型病毒性肝炎hepatitisC由丙型肝炎病毒感染引起的病毒性肝炎。注簡稱丙型肝炎或丙肝。丙型肝炎病毒抗體檢測hepatitisCvirusantibodydetection對人體免疫細胞因HCV感染產生的丙型肝炎病毒抗體進行檢測的一種方法。檢測方法是酶聯免疫吸附分析法、化學發光法和免疫層析法等。丙型肝炎病毒核酸檢測hepatitisCvirusnucleicaciddetection利用分子生物學方法確定查找患者的血液中是否存在丙肝病毒的核酸，來判斷是否被丙肝病毒感染DB32/T4578.4—20232的檢測方法。注：核酸檢測分為定性和定量檢測。主要檢測方法有轉錄介導擴增、反轉錄-聚合酶鏈反應和實時熒光定量聚合酶鏈反應。3.5丙型肝炎病毒基因分型檢測hepatitisCvirusgenotypingdetection利用分子生物學方法確定丙型肝炎病毒的基因型及亞型。注：基因分型檢測主要基于基因序列測定和基于特異性核苷酸互補探針結合的方法。3.6實驗室生物安全laboratorybiosafety實驗室的條件和狀態不低于容許水平，可避免實驗室人員、來訪人員、社區及環境受到不可接受的損害，以保證人員和環境相對處于相對沒有危險或殘余風險可接受的狀態。3.7生物安全實驗室biosafetylaboratories通過防護屏障和管理措施，達到生物安全要求的病原微生物實驗室。3.8室內質量控制internalqualitycontrol為達到質量要求所采取的實驗室內的作業技術和活動。3.9室間質量評價externalqualityassessment多家實驗室分析同一標本，并由外部獨立機構收集和反饋實驗室上報的結果，以此評價實驗室操作的過程。標準操作程序standardoperatingprocedure；SOP將某一實驗全部標準操作步驟和要求以統一的格式描述出來，用來指導日常工作。職業暴露occupationalexposure職業工作人員，如醫生、護士、實驗室技術人員、人民警察等，在從事診療、護理或其他職業工作過程中意外被丙型肝炎患者的血液、體液污染了破損的皮膚或者黏膜，或者被含有丙型肝炎病毒的血液、體液污染了的針頭及其他銳器刺破皮膚，有可能導致丙型肝炎病毒感染風險的情況。4縮略語下列縮略語適用于本文件。BSL?2：二級生物安全實驗室（BiosafetyLevel?2）RNA：核糖核酸（RibonucleicAcid）5開展檢測項目5.1丙型肝炎病毒抗體檢測。5.2丙型肝炎病毒核酸檢測。丙型肝炎病毒核酸檢測主要包括以下檢測內容：a）丙型肝炎病毒RNA定性檢測；b）丙型肝炎病毒RNA定量檢測；DB32/T4578.4—20233c）丙型肝炎病毒基因分型檢測。6實驗室建設6.1設施與環境6.1.1丙型肝炎病毒檢測實驗室應按BSL-2的標準建設。具體要求見GB19489和GB50346。6.1.2實驗室應通過二級生物安全實驗室備案。6.1.3醫療機構丙型肝炎病毒核酸檢測實驗室建設依據《醫療機構臨床基因擴增管理辦法》及其附件《醫療機構臨床基因擴增檢驗實驗室工作導則》。6.1.4基本設備包括壓力蒸汽滅菌鍋、二級生物安全柜、冰箱、生物安全型離心機、加樣器等基本設備，應與所開展檢測項目和工作量相適應。6.2管理體系文件6.2.1實驗室內具備完善的管理體系文件，至少應包含實驗室規章制度、質量手冊、程序文件、作業指導書、生物安全管理文件等，明確實驗室負責人、安全負責人和安全監督員，按照ISO/IEC17025的要求。6.2.2實驗室內所有丙型肝炎病毒檢測項目應具有但不僅限于檢測方法的SOP、原始記錄、質量控制、高壓滅菌記錄等記錄文件，并及時更新。6.3人員要求6.3.1需配備2名以上檢測技術人員，至少1人具有中級及以上衛生技術職稱。每年進行一次人員比對考核。6.3.2丙型肝炎病毒檢測實驗室或實驗室設立單位應當每年定期對檢測技術人員進行培訓，保證其掌握實驗室技術規范、操作規程、生物安全防護知識和實際操作技能，并進行考核。檢測技術人員經考核合格的，方可上崗。上崗培訓內容至少應包括（參考《病原微生物實驗室生物安全管理條例》第三十四條規定）：a）丙型肝炎病毒檢測相關基礎知識；b）丙型肝炎病毒相關檢測技術及管理要求，試驗操作，質量保證與質量控制，生物安全等。6.3.3報告簽署人員應分為檢驗人、復核人和簽發人，且三人不可重復，其中簽發人可根據報告機構工作需求選擇是否在報告單中體現。6.3.4檢驗人需接受過市級及以上丙型肝炎病毒檢測技術培訓，并獲得培訓證書；要求掌握相關專業知識和技能，能獨立熟練地操作，并經考核合格，持證上崗。6.3.5復核人、簽發人應具備對檢測過程進行分析和處理的能力。6.4實驗室檢測能力及職能要求6.4.1二級以上綜合醫院、傳染病?？漆t院、丙肝定點醫療機構和疾病預防控制機構丙型肝炎檢測實驗室應具備抗體檢測和核酸檢測能力。傳染病?？漆t院、丙肝定點醫療機構還應具備基因分型檢測能力。6.4.2其他醫療衛生機構應具備丙型肝炎病毒抗體檢測能力。6.4.3第三方檢測機構丙型肝炎檢測實驗室可根據工作需求選擇相應的檢測能力。6.4.4具有管理職能的實驗室應負責對管轄實驗室進行管理、培訓、督導、考評等工作并提供技術支持。6.4.5實驗室應配合傳染病報告人員完成丙肝抗體陽性且核酸檢測陽性病例在國家傳染病監測系統的上報工作。DB32/T4578.4—202347實驗室管理7.1質量控制7.1.1室內質量控制實驗室應建立質控計劃并開展室內質量控制。采購符合本實驗室檢測方法的商品化弱陽性質控品，并與樣品在同等條件下進行檢測。選擇合適的質控方法、設定質控失控規則，質控數據可溯源，及時發現并處理失控情況。7.1.2室間質量評價實驗室每年至少參加一次由有資質的第三方單位組織的室間質量評價或能力驗證考核且成績合格。如無法參加室間質量評價，可用實驗室間比對代替，結果形成報告保存。7.2生物安全防護7.2.1丙型肝炎病毒相關檢測的生物安全級別丙型肝炎病毒不是高致病性病原微生物，但未經滅活的感染性材料應在符合二級生物安全實驗室中進行。7.2.2實驗室生物安全保障措施實驗室應建立安全制度、標準操作程序、意外事故處理預案及信息安全保密制度。7.2.3培訓和管理培訓并強化“普遍性防護原則”。所有檢測人員應接受過生物安全培訓并掌握生物安全防護用品和儀器設施使用方法、意外事故處理方法。7.2.4個人防護實驗室工作人員上崗前及其后每年應進行丙型肝炎病毒標志物本底檢測并保留檢測記錄。實驗室為工作人員提供充分的個人防護用品和個人防護設施。8實驗室操作8.1實驗室生物安全操作8.1.1試劑的管理和使用保證試劑包裝完整性，按試劑要求溫度、環境保存。8.1.2樣品的管理和使用參照GB/T38576，依據《病原微生物實驗室生物安全管理條例》妥善保管丙型肝炎抗體陽性和丙型肝炎RNA陽性樣本，樣本保存、運輸、銷毀應有記錄。DB32/T4578.4—202358.1.3實驗室檢測過程丙型肝炎病毒感染性生物樣品離心應使用生物安全型離心機；開蓋、加樣等操作應在生物安全柜中進行或在具有高效過濾器的自動脫蓋機中開蓋并在封閉機器內自動加樣。8.1.4實驗室的清潔和消毒參照GB19489和WS/T369處置。實驗室發生核酸污染處理后需對實驗室內環境采樣并進行丙型肝炎病毒核酸檢測，結果陰性后才可恢復核酸檢測工作。8.2實驗室檢測操作8.2.1根據檢測方法不同，樣品可選擇血清、血漿或全血。樣品應具有實驗室唯一標識，可溯源。8.2.2試劑出入庫明細清楚，按要求保存。臨床診斷用試劑應是經國家藥品監督管理部門注冊、在有效期內的試劑。使用的試劑和儀器應做適用性和性能驗證，相同試劑盒不同批號之間應做批號比對。8.2.3所有實驗室內開展的丙型肝炎病毒檢測實驗應按照SOP及試劑說明書操作，保存原始記錄以保證結果可溯源。8.2.4每批次項目檢測須同時完成該項目室內質控品檢測。8.2.5