QBT 8141-2025 飲料中綠原酸類化合物的測定 高效液相色譜法標準立項發展報告

飲料中綠原酸類化合物的測定高效液相色譜法StandardizationDevelopmentReport:DeterminationofChlorogenicAcidCompoundsinBeveragesbyHighPerformanceLiquidChromatography摘要隨著我國飲料工業的快速發展和消費者健康意識的不斷提升，飲料中功能性成分的準確測定成為食品質量安全控制的重要環節。綠原酸類化合物作為飲料中常見的生物活性成分，具有抗氧化、抗炎、調節血糖等多種生理功能，其含量水平直接影響飲料的品質評價和營養聲稱。然而，目前我國尚未建立統一的飲料中綠原酸類化合物的測定標準方法，各檢測機構和企業實驗室在檢測過程中存在方法不一、結果可比性差等問題。為填補這一標準空白，工業和信息化部下達了《飲料中綠原酸類化合物的測定高效液相色譜法》行業標準制定計劃，標準編號為QB/T8141-2025。該標準由全國食品工業標準化技術委員會歸口管理，多家權威檢測機構和科研院所共同參與起草。標準規定了飲料中綠原酸、新綠原酸、隱綠原酸、異綠原酸A、異綠原酸B、異綠原酸C等六種主要綠原酸類化合物的高效液相色譜測定方法，適用于飲料中上述化合物的定性定量檢測。本標準的發布實施將有效規范飲料行業綠原酸類化合物的檢測技術，為產品質量控制、市場監管和功能性飲料的研發提供有力的技術支撐。關鍵詞：綠原酸類化合物；高效液相色譜法；飲料；行業標準；檢測方法；質量控制AbstractWiththerapiddevelopmentofChina'sbeverageindustryandthecontinuousimprovementofconsumers'healthawareness,theaccuratedeterminationoffunctionalcomponentsinbeverageshasbecomeanimportantpartoffoodqualityandsafetycontrol.Chlorogenicacidcompounds,ascommonbioactivecomponentsinbeverages,possessvariousphysiologicalfunctionssuchasantioxidant,anti-inflammatory,andbloodglucoseregulation,andtheircontentlevelsdirectlyaffectthequalityevaluationandnutritionalclaimsofbeverageproducts.However,nounifiedstandardmethodforthedeterminationofchlorogenicacidcompoundsinbeverageshasbeenestablishedinChina,resultinginissuesofinconsistentmethodsandpoorcomparabilityofresultsamongdifferenttestinginstitutionsandenterpriselaboratories.Tofillthisstandardgap,theMinistryofIndustryandInformationTechnologyissuedtheplanforthedevelopmentoftheindustrystandard"DeterminationofChlorogenicAcidCompoundsinBeveragesbyHighPerformanceLiquidChromatography,"numberedQB/T8141-2025.ThestandardisunderthecentralizedmanagementoftheNationalFoodIndustryStandardizationTechnicalCommittee,withmultipleauthoritativetestinginstitutionsandresearchinstitutesparticipatinginitsdrafting.ThestandardspecifiestheHPLCmethodforthedeterminationofsixmajorchlorogenicacidcompoundsinbeverages,includingchlorogenicacid,neochlorogenicacid,cryptochlorogenicacid,isochlorogenicacidA,isochlorogenicacidB,andisochlorogenicacidC,andisapplicabletothequalitativeandquantitativedetectionoftheabovecompoundsinbeverages.Thepublicationandimplementationofthisstandardwilleffectivelystandardizethedetectiontechnologyofchlorogenicacidcompoundsinthebeverageindustry,providingstrongtechnicalsupportforproductqualitycontrol,marketsupervision,andthedevelopmentoffunctionalbeverages.Keywords:Chlorogenicacidcompounds;Highperformanceliquidchromatography;Beverages;Industrystandard;Detectionmethod;Qualitycontrol一、引言1.1研究背景綠原酸類化合物（ChlorogenicAcidCompounds）是由咖啡酸與奎尼酸通過酯鍵結合形成的酚酸類化合物，廣泛存在于咖啡、茶、金銀花、杜仲、菊苣等植物原料中。該類化合物具有顯著的抗氧化活性，能夠清除體內自由基，延緩細胞氧化損傷；同時具有抗炎、抗菌、保肝利膽、調節糖脂代謝等多種生物活性。近年來，隨著功能飲料市場的迅速擴張，富含綠原酸類化合物的植物飲料、咖啡飲料、茶飲料等產品日益增多，消費者對飲料中活性成分含量的關注度持續升溫。然而，與飲料行業的快速發展相比，綠原酸類化合物的檢測標準體系建設明顯滯后。目前，我國涉及綠原酸檢測的標準主要針對中藥材和植物原料，如《中華人民共和國藥典》中收載的金銀花、杜仲等藥材的含量測定方法，以及部分植物提取物的相關標準。對于成分復雜、基質多樣的飲料產品，尚缺乏統一、規范的綠原酸類化合物測定標準。由于飲料中糖類、色素、有機酸等共存成分復雜，直接套用藥材檢測方法往往導致分離度差、回收率低、基質干擾嚴重等問題，難以滿足飲料產品質量控制的實際需求。1.2標準立項的必要性飲料中綠原酸類化合物檢測標準的缺失帶來了多方面的現實問題。第一，各生產企業采用自建方法進行內控檢測，方法原理、儀器條件、前處理流程各不相同，導致同類產品的檢測結果缺乏可比性。第二，市場監管部門在監督抽查過程中缺乏統一的判定依據，不利于公正執法和消費者權益保護。第三，功能性飲料在宣稱"富含綠原酸"等營養聲稱時，缺少公認的檢測方法作為驗證支撐，容易產生虛假宣傳和誤導消費的風險。第四，隨著飲料產品進出口貿易的不斷增長，檢測方法的不統一也增加了國際貿易中的技術壁壘風險。1.3標準制定依據本標準依據《中華人民共和國標準化法》和《行業標準管理辦法》的有關規定，按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規則》的要求進行編制。標準計劃由工業和信息化部下達，由全國食品工業標準化技術委員會（SAC/TC64）歸口管理。標準的制定緊密圍繞飲料行業的技術發展需求，充分參考了國內外相關標準和技術文獻，經過廣泛調研、實驗驗證和專家審議等程序完成編制工作。二、標準主要內容2.1范圍界定本標準規定了飲料中綠原酸類化合物的高效液相色譜測定方法，包括方法原理、試劑與材料、儀器與設備、樣品前處理、色譜條件、定性定量分析、精密度和準確度等技術內容。標準適用于咖啡飲料、茶飲料、植物飲料及其他含有綠原酸類化合物的飲料產品中綠原酸、新綠原酸、隱綠原酸、異綠原酸A、異綠原酸B、異綠原酸C六種化合物的測定。2.2方法原理本標準采用高效液相色譜法（HighPerformanceLiquidChromatography，HPLC）作為核心檢測技術。其方法原理為：試樣經適當的提取和凈化處理后，注入高效液相色譜儀，利用待測物在C18反相色譜柱上的保留行為差異實現各綠原酸類化合物的分離，經紫外檢測器（UV）或二極管陣列檢測器（DAD）在特定波長下進行檢測，以色譜峰的保留時間進行定性，以色譜峰面積（或峰高）通過外標法進行定量。選擇高效液相色譜法作為標準方法，主要基于以下幾方面考量：一是高效液相色譜法技術成熟、儀器普及率高，在食品檢測實驗室中已廣泛配備；二是該方法對綠原酸類化合物具有良好的分離效果和檢測靈敏度，能夠滿足飲料中綠原酸類化合物的定量分析需求；三是相較于液相色譜-質譜聯用法（LC-MS/MS），高效液相色譜法運行成本較低，更易于在基層檢測機構和企業實驗室推廣應用。2.3樣品前處理樣品前處理是飲料中綠原酸類化合物測定的關鍵環節。考慮到不同飲料基質差異較大，標準針對不同類型樣品規定了相應的前處理方案。對于成分相對簡單的透明液體飲料（如碳酸飲料、水果飲料等），可采用直接稀釋過濾的方式處理，即準確量取一定量試樣，經0.45μm微孔濾膜過濾后直接進樣分析。對于含有蛋白質、脂肪或大顆粒懸浮物的飲料（如含乳飲料、植物蛋白飲料等），需先經離心處理去除懸浮物，再經固相萃取（SPE）小柱凈化以除去蛋白和脂肪等干擾物質。對于含有二氧化碳的碳酸飲料，需先經超聲脫氣處理后再行量取。2.4色譜條件標準推薦的色譜條件為：采用C18反相色譜柱（柱長150mm～250mm，內徑4.6mm，粒徑3μm～5μm），柱溫控制在30℃～40℃之間。流動相采用乙腈-磷酸水溶液（或乙酸水溶液）體系進行梯度洗脫，檢測波長設定在325nm～330nm之間（綠原酸類化合物的最大吸收波長）。流速一般為0.8mL/min～1.2mL/min，進樣量為10μL。各綠原酸類化合物的分離順序在標準色譜條件下依次為新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、異綠原酸B、異綠原酸A、異綠原酸C，六種化合物在30分鐘內可實現基線分離，各色譜峰的理論塔板數不低于5000，分離度不低于1.5。2.5定性定量方法本標準采用保留時間法定性，即以標準品色譜圖的保留時間與試樣色譜圖中相應色譜峰的保留時間進行比對，偏差不超過±0.5%。對于可疑峰，可通過二極管陣列檢測器獲取紫外光譜圖進行輔助定性。定量方法采用外標法（多點校正），即將系列濃度的混合標準工作溶液依次注入色譜儀，記錄色譜峰面積，繪制峰面積-濃度標準曲線，要求標準曲線的相關系數r不低于0.995。試樣中各組分的含量根據標準曲線計算得到。2.6方法性能指標經多家實驗室協同驗證，本標準方法的主要性能指標達到以下水平：檢出限與定量限：六種綠原酸類化合物的檢出限（信噪比S/N=3）為0.02mg/L～0.05mg/L，定量限（信噪比S/N=10）為0.05mg/L～0.15mg/L，能夠滿足各類飲料樣品中綠原酸類化合物含量測定的靈敏度要求。精密度：在重復性條件下，同一實驗室對同一試樣進行多次平行測定的相對標準偏差（RSD）不超過5%；在再現性條件下，不同實驗室間測定的相對標準偏差不超過10%。線性范圍：六種綠原酸類化合物在0.5mg/L～100mg/L濃度范圍內呈現良好的線性關系。三、標準編制的技術創新點3.1首次建立覆蓋飲料基質的綠原酸類化合物系統檢測方法本標準是我國輕工行業首個針對飲料中綠原酸類化合物的檢測方法標準，填補了該領域的標準空白。以往綠原酸的檢測標準主要面向中藥材和植物原料，而本標準針對飲料產品的特殊性進行了系統的方法學研究和方法驗證，充分考慮了飲料中糖類、色素、有機酸、香精等多種共存成分對測定的干擾及其消除方案。3.2六種主要綠原酸類化合物同步檢測標準實現了綠原酸、新綠原酸、隱綠原酸、異綠原酸A、異綠原酸B、異綠原酸C六種主要化合物的同步分離與定量分析，克服了以往單一檢測綠原酸或僅檢測總綠原酸的局限性。這六種化合物是飲料原料中最為常見且含量較高的綠原酸類組分，覆蓋了咖啡酰奎寧酸類的典型結構類型（3-位、4-位、5-位取代及雙咖啡酰取代），能夠較為全面地反映飲料中綠原酸類化合物的組成特征和含量水平。3.3針對不同飲料基質的差異化前處理策略飲料產品種類繁多，基質差異顯著。標準在充分調研的基礎上，將適用范圍內的飲料進行了科學分類，針對不同類型飲料規定了差異化前處理方案，既保證了方法對不同基質的適應性，又兼顧了操作簡便性和檢測效率。對于基質簡單、干擾較少的飲料采用直接稀釋過濾法；對于基質復雜的飲料則引入固相萃取凈化步驟，有效降低了基質效應。四、修訂的企事業單位或標委會介紹4.1全國食品工業標準化技術委員會本標準由全國食品工業標準化技術委員會（SAC/TC64）歸口管理。該技術委員會是在國家標準化管理委員會和工業和信息化部的領導下，負責全國食品工業領域標準化技術工作的專業組織。委員會由來自科研院所、高等院校、檢測機構、行業協會和龍頭企業的專家組成，在食品工業標準體系規劃、標準制修訂和技術審查方面具有豐富的經驗和深厚的專業積累。在本標準的制定過程中，全國食品工業標準化技術委員會充分發揮了組織協調和技術把關作用，組織多輪專家研討會和意見征集活動，對標準的技術內容進行了嚴格的科學性審查和規范性審查，確保了標準的質量水平。4.2主要起草單位本標準的主要起草單位包括中國食品發酵工業研究院有限公司、中國檢驗檢疫科學研究院、廣東省食品檢驗所等權威技術機構。其中，中國食品發酵工業研究院有限公司（以下簡稱"研究院"）是輕工行業具有重要影響力的綜合性研究開發機構，長期從事食品發酵領域的科學研究和標準化工作。研究院成立于1955年，前身為輕工業部食品發酵工業科學研究所，經過數十年的發展，現已成為集科學研究、標準制定、質量檢測、技術咨詢于一體的綜合性研究機構。研究院設有國家食品質量監督檢驗中心、全國食品發酵標準化中心等國家級技術平臺，承擔著大量食品領域國家標準、行業標準和團體標準的制修訂工作。在飲料質量安全領域，研究院先后主持和參與制定了多項飲料產品標準和檢測方法標準，在高效液相色譜分析技術方面積累了豐富的研究成果和實踐經驗。五、標準實施的意義與展望5.1對飲料行業的重要意義QB/T8141-2025標準的發布實施對飲料行業具有多重積極意義。首先，標準為飲料生產企業提供了統一、規范、可靠的綠原酸類化合物檢測方法，有助于企業加強原料把關和出廠檢驗，提升產品質量控制水平。其次，標準為市場監管部門提供了明確的技術判定依據，有助于規范市場競爭秩序，打擊虛假宣傳行為，保護消費者合法權益。第三，標準為功能性飲料的產品研發和創新提供了技術支撐，企業可以依據標準方法對產品中綠原酸類化合物的含量進行準確評價，為新產品的品質聲稱和差異化競爭提供數據支撐。5.2對標準化體系建設的促進本標準的制定完善了我國飲料領域檢測方法標準體系，填補了飲料中酚酸類活性成分檢測標準的空白。標準的實施將帶動飲料行業從單純關注食品安全指標向食品安全與品質功能并重的方向發展，促進飲料標準體系從基礎安全標準向品質提升標準延伸。5.3未來發展方向隨著分析技術的不斷進步和飲料行業的持續創新，綠原酸類化合物的檢測方法標準仍有進