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DB34DB34/T3283—2018副豬嗜血桿菌的分子分型MLST方法MultilocussequencetypingdetectionmethodforHaemophilusparasuis2018-12-29發(fā)布2019-01-29實(shí)施安徽省市場監(jiān)督管理局發(fā)布I1GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)4.4dNTP：dATP、dTTP），24.115×TBE電泳緩沖液：445mmo采用細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒，提取經(jīng)過NY/T2物。引物在使用前按照引物合成時(shí)的既定濃3后使用Lasergene7.1對(duì)序列進(jìn)行ClustalV分析，將上下游序列整合后得到完整序列，為減小誤差首尾的幾個(gè)堿基不計(jì)算入序列測定結(jié)果。最后將測序結(jié)果上傳至MLST網(wǎng)站()進(jìn)行在線數(shù)據(jù)分析，得到的結(jié)果與MLST數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比對(duì)。將所得到的副豬嗜血桿菌7個(gè)管家基因核酸擴(kuò)增片段DNA序列進(jìn)行MLST分析，獲得菌株所對(duì)應(yīng)的等位基因圖譜，確定副豬嗜血桿菌分離株的序），），4ATP合成酶β鏈基因(βchainofATPsynthase）蘋果酸脫氫酶基因（malatedehyd6-磷酸葡萄糖脫氫酶基因（6-phosphogluco3-磷酸甘油醛脫氫酶基因（glyceraldehyde-3-phosphatedeh延胡索酸還原酶基因（fumaratereduTCTAATACTTTGTT
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