X射線光電子能譜(XPS)對納米復合物地表面分析報告

實用標準文案X射線光電子能譜(XPS)對納米復合物的表面分析EfratKorin,*, ?NatalyaFroumin, ?,§andSmadarCohen ?,§,∥?avramGoldstein 和格倫-星生物技術工程部，工程? departmentofMaterials ，§theIlseKatz nanoscale 協會科技，醫藥和∥ regenerative 干細胞（rMSCs）研究中心，本古里安大學的內蓋夫 84105 茶，啤酒舍瓦，以色列摘要：自組裝單分子自發組成的連接通過非共價相互作用的納米復合物最近成為通用的替代傳統的藥物控釋系統由于其獨特的生物特性（反應，動力學，等）。這種納米復合物的表征通常包括粒度分布、 表面電荷、形態、藥物包封E?效率，并驗證?陽離子標記組件使用共存研究在納米復合物的共存。不常見的是coassembled 納米復合雙?不同組件之間的分子間的相互作用的直接檢驗，特別是在吸濕組件組成的納米復合物， 因為方便的方法仍缺乏。在這里，我們提出了一個詳細的實驗協議，用于測定表面組成和化學鍵的 X-射線光電子能譜（XPS）干燥后的沉積物吸濕性樣品隔夜在特高壓。我們應用這個方法來研究二元鈣siRNA 納米復合物和透明質酸硫酸三元納米復合物的表面化學（已經） -鈣的siRNA，沉積在晶片。值得注意的是，我們發現，該協議可以實現與傳統的 X射線光電子能譜儀對沉積納米復合物的表面組成和相互作用的研究， 它只需要一個相對少量的納米懸浮液。關鍵詞：XPS、滴沉積、表面特性、藥物載體、納米復合物■簡介文檔實用標準文案X射線光電子能譜（XPS），也被稱為電子光譜化學分析（ ESCA），是一個敏感的光譜定量分析技術，對材料的表面化學。用一束 X射線等典型鋁鉀或鎂αKα源照射材料得到了XPS光譜，同時測量的動能和電子，從被分析的材料的表面原子逃逸數。1用電子從表面逸出和結合能的強度（從測量的動能記錄計算），得到的XPS譜圖。在XPS表面分析中，為了獲得光譜中的最大電子計數，需要一個超高真空系統，因為分析儀通常離 X射線照射表面只有一米遠。超高真空表面分析技術定性和定量地估計元素的元素組成， 原子序數的鋰和以上，除了確定類型的化學鍵和氧化狀態的材料表面。 XPS已廣泛應用于研究各種各樣的領域、表面化學，如電子取證， 2、生物學等等。然而，由于傳統的 XPS必須保持特高壓環境，這種方法僅限于在研究半導體的表面固體樣品和重點，薄 ?LMS和涂層（例如，金屬/金屬氧化物/DNA?LM），3-5biosensors6，干燥粉末藥品的材料。7-14在過去的十幾年里，由多組分納米復合材料制成的自組裝納米粒子被用于控制藥物的傳遞。對多組分納米復合材料的形成及其特征的驗證通常是通過對凈表面電荷和顆粒大小的變化來進行的，同時也對該治療劑的誘捕效率進行了評估。只有少數出版物通過研究它們表面的化學特征， 通過獲取表面成分的信息和參與NP形成的鍵類型來驗證 NPs中不同組分的共存。15、16主要是大量的化學分析，如核磁共振波譜(NMR)和傅立葉變換紅外光譜(FTIR)吸收光譜，通過檢測特定的官能團來確定納米復合物中不同組分的存在。 13、17-22然而,核磁共振和紅外光譜requirerelatively大樣本數量,更重要的是,它們的光譜的變化還不足以提供明確的證據證明nanocomplex形成(因為低靈敏度或峰重疊)。另外，XPS的表面化學特性可以區分表面上的各種官能團(達到10納米的深度)，收集到的數據可文檔實用標準文案以提供有價值的知識，以闡明納米復合物與周圍環境的可能相互作用。進一步 ,分析需要相對較小的樣本數量 ,例如在這里提供的示例 5μLnanocomplex 解決方案(12.5μMsiRNA,0.5、125μg/毫升alg)可以檢查。本論文描述了XPS分析的實現，利用傳統的商用 XPS設備，闡明了由二元或三重組分組成的自發組裝的納米絡合物的表面組成和結合作用。 二元納米絡合物由siRNA和鈣離子(表示Ca2+-siRNA, 23)組成，三元組由透明質酸(HAS)、siRNA和鈣離子組成，表示 hasca2+- siRNA。在后者的納米復合物中，有和siRNA 之間的靜電相互作用是由鈣離子橋介導的。單標記納米復合物的透射電子顯微圖(帶有金標記的 siRNA或金標記物)展示了粒子核心中 siRNA分子的空間組織，其周圍有一層。當 siRNA-Cy5 和has-555在用雙標記的納米復合物治療后在HepG2 細胞中顯示時，在納米復合物中的存在和 siRNA成分得到進一步的證實(HAS(555)-ca2+-siRNA(Cy5)) 。然而，這些方法中沒有一種能夠提供有關參與并形成形成的納米顆粒中的鍵的功能組的信息。 為了闡明has-ca2+- sirna納米復合物的表面組成和結合相互作用，我們采用了 XPS分析。由于所檢測的樣品具有吸濕性 (因為它是用氯化鈣配制的 )，因此在UHV的夜間干燥下，可以從納米復懸浮體中蒸發出無束縛的溶劑。在 UHV條件下，在UHV條件下干燥樣品，避免引入可能通過其他干燥過程，如凍干 (凍干)的污染。提出了一個詳細的過程,只需要少量(5-10μL)稀釋 nanocomplex 中止調查nanocomplex 內的相互作用。■材料試劑。試劑為Nanocomplex 準備。文檔實用標準文案·無rnase -游離碳酸二乙酯(DEPC)-處理過的水(生物工業，Kibbutz Beithek,Israel,catno.)852 年01-- 1)?二水氯化鈣(試劑+年級≥99.0%,Sigma-Aldrich 以色列有限公司 Rehovot以色列,貓沒有。小干擾rna(C3881SIGMA-Aldrich)?unlabeled-sieGFP 序列5′-GCCACAACGUCUAUAUCAU-3 ′,踴躍參與,珊瑚鎮,IA,分析級)透明質酸硫酸鹽(半合成硫酸導數的哺乳動物粘多糖透明質酸)準備從Hyaluronan 25如前所述(鈉鹽,150kDa,Lifecore 生物醫學,Chaska,MN,HA100K，分析等級)?RNase away spray(Ornat,Rehovot,Israel,cat) 。沒有 mbp -7002)?一次性注射器過濾器(0.2μm膜過濾;Minisart 海里;LSartorius GmbH 是一家現代化的、可靠的產品供應商。 16534-k)晶片清理和附加的試劑。?8毫米寬的真空兼容，高純度導電雙面膠粘帶 (Nisshin EMCo.，Ltd.，Tokyo,Japancatno.)15000508 -)乙醇絕對(脫水,高效液相色譜法生物實驗室有限公司,耶路撒冷,以色列,貓沒有。052506)。?丙酮(HPLC等級，生物實驗室有限公司，耶路撒冷，以色列， cat no。010306)。設備。干凈的鑷子，機械的移液管和操作技巧玻璃瓶子(如果想要清除晶片)無摻雜，雙面拋光Cz硅片(3英寸)。直徑175-500μm厚度、p型,1--0取向,Ω>20厘米,弗吉尼亞半導體或類似樂器 ,貓沒有。OA39d1611045) 。文檔實用標準文案?雕刻筆，硬質合金尖端 (sigmaaldrich Israel Ltd .，Rehovot,Israel,catno.)Z225568 奧爾德里奇)?Elmasonic S10H超聲波清洗單元(埃爾瑪漢斯 Schmidbauer GmbH &Co.公斤或類似)?x射線光電子譜儀 ESCALAB250超高真空(1×10-9條)裝置與一個AlKαx射線源和單色儀(熱費希爾科學Inc.,沃爾瑟姆,英國(或類似的工具)。?XPS樣品持有者(Thermo Fisher Scientific 公司，Waltham,UK 或similar)。x射線光束大小是 500μm。為了分析，使用了一個智能背景，并與洛倫茲/高斯混合比(30%)進行了擬合。■過程概述。第一步:選擇晶片和切片步驟2:硅片清理?步驟3:Nanocomplexes 樣品制備?步驟4:Nanocomplexes 樣品沉積和干燥在特高壓步驟5:XPS采集參數設置步驟6:XPS譜收購第七步:清理第八步:XPS數據處理和分析1。選擇晶片和切片(10-15分鐘)。1-1。選擇晶片。選擇適合于樣品測試的晶圓。在這里，硅晶片被用作樣品的襯底，因為它很容易被切割成所需的尺寸。此外，晶圓片的 Si信號可以在XPS測文檔實用標準文案量中使用，以區分樣品中部分或全部覆蓋的區域 (參見步驟6-1)，從而便于選擇合適的采樣點。關鍵步驟 :選擇合適的襯底，很大程度上取決于所檢測樣品的性質，而用作滴注的溶劑有可能改變表面化學。推薦使用晶片至少 250μm厚,因為薄的晶片更容易開裂 ,很難處理當 XPS試樣架的安裝和移除。1-2。切割晶片(視頻S1,00:05)。手工將硅片片切成矩形片，在晶片表面用刻字筆畫出一行線，并沿樂譜上的晶圓片。尺寸取決于支架的大小和樣品的數量。例如,在一個實驗用4種不同的樣本,我們附4矩形晶圓片(每個大小～14毫米×6毫米,請參見圖1),specimenholder(14 毫米×25毫米)。這晶片大小也適合鑄造一個大幅下降的樣本(10μL)晶片中心或兩個小滴(5μL每個)。關鍵步驟:只要晶圓片不太薄(見step1-1) ，手動切割晶片相對容易。必須小心不要刮去晶圓片的表面。試著避免裂化晶圓片。在晶片切割成碎片 ,每個人都應該考慮到最終的碎片大小必須適合標本夾大小和支持至少 5μL液滴的樣本。2。硅片清理(20-30分鐘)。將乙醇倒入一個干凈的玻璃瓶中。 將丙酮倒入另一個玻璃瓶中。浸泡的片晶圓瓶含有丙酮和 ultrasonicate 5分鐘的晶片在 rt,去除晶片,并將其瓶含有乙醇和ultrasonicate 的晶片在rt,最后5分鐘,沖洗的晶片超濾器高電阻率去離子水和干燥在 rt,建議完成過程用溶劑清洗解決方案用于準備樣品 (這里介紹,最后用DEPC-treated 水清洗完成)。關鍵步驟:一般來說，購買的硅片被認為足夠干凈，不需要任何額外的處理。如果涉及到污染問題在切割或處理過程中，晶片可以被輕柔地清洗。建議所有晶圓都要經過相同的清洗工序，因為表面的變化會影響結晶過程。文檔實用標準文案3Nanocomplex 樣品制備(變量)。準備您的示例解決方案和任何需要的參考解決方案 (例如，組件示例的股票解決方案也可以單獨檢查以獲得其確切組成的信息 )。在本文的例子中，用二乙基焦碳酸鹽(DEPC)處理水制備了雙組分 sirna-ca2+納米復合物和三組分 has-ca2+-sirna 納米復合物。24第一、氯化鈣(2米),siRNAeGFP(50μM),并(250μg/毫升)都在DEPC-treated 剛做好的水和氯化鈣的過濾是通過一個 0.2μMsyringefilter 。has-sirna-ca2+ 納米復合物的制備分為兩步 ;前50μM核(eGFP)溶液和2M氯化鈣溶液混合(體積比為1:1),并保持在室溫(RT)20分鐘,直到完整的絡合。在第二階段,250μg/毫升的解決方案是添加到復雜的懸掛 ,體積比1:1,并保持在30分鐘rt,雙組分siRNA-Ca2+nanocomplexes 準備以類似的方式,在第二步相反添加解決方案我們添加了 DEPC-treated 水。關鍵步驟:因為在這個技術中，形成納米復合物的不同成分之間的相互作用是通過觀察組成納米復合物的元素的 XPS譜的變化來決定的，因此避免使用含有這些元素的溶劑、緩沖溶液等是很重要的。例如，在這里提出的案例中。 DEPC水作為溶劑而不是玫瑰((4-(2-hydroxyethyl)1piperazineethanesulfonic 酸)10毫米,pH值7),我們還研究了S2p的變化信號從聚合物(已經),需要避免的貢獻玫瑰這個信號。另一個考慮因素是樣本濃度 ;上面的元素必須檢查檢出限 (根據不同的元素,通常～0.2%的原子百分比)。4Nanocomplex 樣品沉積和干燥在特高壓 (-14日20h)。4-1持有者準備(視頻S1,1:28)。采用真空兼容、高純度導電雙面膠粘帶，將晶圓片與XPS試件夾附在一起。在標本夾的上邊緣和下緣放兩條雙面膠帶 (圖1b)。文檔實用標準文案接下來，將晶片片放在雙面膠布上 (圖1c)。使用干凈的手套和鑷子避免污染晶圓。必須注意只觸摸邊緣(不包括分析區域)。最后，用鑷子將晶片輕輕壓入固定的碳雙面膠帶，確保晶圓與膠帶之間的黏附。關鍵步驟 :晶片相當溫和，一旦放置在雙面膠帶上很難去除。將晶圓片壓在膠帶上，應小心謹慎，避免晶圓的開裂和破裂。建議將膠帶貼在支架的底部和頂部邊緣， 這樣當晶片被固定時，就避免了晶片中心的污染(這是跌落鑄造的區域)。4-2。樣品沉積(視頻S2,0:05)。可以下一大滴的樣品(10μL)或兩個小水滴(每5μL)晶片的中心(大小～14毫米×6毫米);參見圖1e。關鍵步驟:晶圓片上的樣品掉落必須放置在holder區域內，因為樣品的邊界外的任何部分都不能被光譜儀所使用。我們發現將2滴(5μL干燥面積～2毫米)或一個大幅下降(10μL干燥的地方,～4毫米)足以允許為每個樣本抽樣從幾個點,當x射線光束大小是 500μm。4-3。在UHV條件下的蒸發樣品干燥(視頻S2,0:30)。小心地將標本夾放在出入口鎖腔內 (入口鎖和分析室由一個閥門系統隔開，每次隔離一個閥門)。在轉入分析室進行 XPS分析前，隔夜干燥。基本的壓力過渡艙約1×10-8mbar。如果使用了幾個樣品，其中一個應該放在機械臂上，以便以后可以進入分析室。與此同時，其他裝載的樣品必須保存在進入閘室，直到檢查為止。重要的是要注意，當裝入的樣品支架被另一個支架取代時，必須用干氮排放出入口鎖腔以保持低水壓。下降的關鍵步驟:超高真空干燥和保存的干樣品過渡艙室可以擴展 24h。不建議保持較長時間的樣品室 ,因為部分的干層樣品可以開始瓦解和脫落。吸濕的樣品在從出入口鎖孔取出后立即吸水 (圖1f)。5。XPS采集參數設置(～10分鐘)。文檔實用標準文案具體情況可能會有所不同，這取決于所使用的特定 XPS儀器和軟件的特性，以及所研究的樣本的特性。在這項工作中 ,我們使用收集的 XPS數據使用一個x射線光電子譜儀ESCALAB250超高真空(1×10-9條)裝置與一個AlKαx射線源和單色儀。在entrylock 室中過夜后，支架上的干燥樣品被轉移到分析室進行 XPS的記錄。測量后進行樣品持有人被引入分析室和 x射線測量開始(1×10-9mbar);參見圖1g。采用avUNKetm 包進行數據采集。電荷補償是通過電子和氬離子水槍的結合實現的。在這種情況下 ,氬氣壓力室的2×108-4×10-- 8mbar。x射線束的大小是500μm調查光譜被記錄和傳遞能量 (PE)150eV步長1eV和居住時間50毫秒,而高能量分辨率光譜記錄與 PE20eV,步長0.07eV和停留時間100毫秒。Auto-z(即。在每次測量前都要進行自動高度調整，以找到分析儀的焦點。清潔工的每個元素的平均數量的調整 ,以獲得最佳的signalto-noise 比率(清潔工的平均數量是 5-30)。關鍵步驟:所謂的“最優平均掃頻”與最低的掃描次數有關，這是一個良好的信噪比。應避免過度增加掃描次數， 因為它增加了測量時間，從而增加了污染和 x射線導致降解的可能性。6。XPS譜采集(每點～30-60分鐘)。6- 1。選擇采樣點。在樣本點 (圖1h)中隨機選取一個區域，并驗證該步驟是否正確:該步驟確保覆蓋薄片的樣本層足夠厚， 以消除來自晶圓本身的元素的貢獻。建議每個樣品至少檢查 2個點，以確認可重復性，并獲取在干樣中表面的同質性或異質性的信息。6-2。XPS測量采集(視頻S2,1:48)。每一個抽樣點(即，從第6-1 步的注冊位置收集在測量光譜中檢測到的元素的高分辨率光譜。根據這一步的前一步，建議從至少 2個不同的區域收集高分辨率光譜樣本。7清理(5-20分鐘)。文檔實用標準文案保存光譜數據，并從 XPS儀器中取出支架。如果樣品中含有吸濕成分，它會立即在與空氣接觸時開始補充水分 (圖1f)。為了避免持有者受到污染， 首先要小心地吸收雨滴，使用清潔的Kimwipe 擦拭紙，然后從XPS標本夾中取出硅片和膠帶。建議處理使用的硅片。如果在徹底清洗后 (如第2步所述)，硅晶片被重復使用，建議使用 XPS檢查它們，以確保在重新加載樣品前，清洗過程中清除所有污染。8。XPS數據處理與分析(變量)(視頻S2,2:00)。使用XPS數據處理軟件(我們使用Avantage 軟件包進行數據獲取和分析 )。首先校準所有的光譜相對于一個碳 1s峰的位置在284.8 eV以校正充電效應。下一步，通過計算每個元素的原子濃度來確定表面的元素組成 (我們使用元素敏感性因子而不應用任何標準化程序 )。最后，在背景減法后進行反褶積，假設單組分線的形狀為洛倫茲和高斯分量曲線的和。 在分析中，采用了智能背景，采用洛倫茲/高斯混合比30%進行擬合。通過非線性最小二乘曲線擬合的方法，可以通過對實驗數據進行擬合，可以找到信號的光譜分量。要估計債券的類型，比較B。在實驗中獲得的 E值(如NISTx射線光電子能譜數據庫 )或其他相關的已發表的資料。■時間步驟第一步:選擇晶片和切片(10-15分鐘)第二步:硅片清理(20-30分鐘)第三步:Nanocomplex 樣品制備(變量)第四步:Nanocomplex 樣品沉積在特高壓(-14日20h)和干燥步驟第五步:XPS采集參數設置(～10分鐘)文檔實用標準文案第六步:XPS譜采集(每點～30-60分鐘)第七步:清理(5-20分鐘)第八步:XPS數據處理和分析(變量)■故障排除噪聲譜在XPS測量采集(步驟6)。獲得更好的信號/噪聲比,可以提高平均清潔工的每個元素的數量或增加樣品的濃度(如果可能的話)。光譜中痕量污染的出現。檢查晶片表面是否有痕量污染;如果需要，請在示例應用程序前清理。確保使用干凈的鑷子和手套。必須小心，只需要觸及邊緣。此外，購買的股票解決方案也有可能包含用于準備或分離購買材料的元素的痕跡。這可以通過測試所使用的股票解決方案來驗證。■預期的結果在這里給出的案例研究,XPS 分析驗證的形成的二進制 nanocomplex Ca2+核的三元nanocomplexHAS-Ca 2+ sirnafollowingchanges 在表面成分,而主要關注改變結合能nanocomplex 表面檢測到的元素。對二元和三元復合納米復合物的分析和解釋如下。表1。結合能（0.2eV±）和AtomicPercent 用XPS的C，N，O，P元素，得到Ca、Cl、S的siRNA，Ca2+siRNANanocomplexes ，和has-ca2+siRNANanocomplexes文檔實用標準文案二元鈣-siRNANanocomplexes （無聚合物）。中的 Ca2+的siRNA納米復合物，收集的 XPS譜顯示信號從Ca（12.43%）和Cl（31.5%）除了元素起源于siRNA（C1s，1秒，1秒和P2P），如表1和圖2給出了。分配給siRNA的C1s和N1s峰出現在284.8和399.3eV。O1s，P2P、和Ca2p峰在532.1，133.9，和347.8eV，均與文獻報道的幾種鈣磷酸鹽的協議， 如羥基磷灰石[CAL0PO4）6（OH）2]，[、][斜，磷酸氫鈣磷酸氫鈣·2H2O]，焦磷酸鈣【Ca2P2O7]，雙（磷酸鈣）Ca（H2PO4）[2]和鈣（磷酸二dihyrogen水合物Ca（H2PO4））2×H2O。26-28因此，這些結果表明，Ca2+的siRNA納米復合物，鈣離子成鍵與siRNA的磷酸基團。三元HAS-Ca2+sirnaNanocomplexes 。在三元hasca2+-sirna 納米復合物的情況下，研究了表面的相互作用，主要是聚焦于 p2p 信號的結合能的變化，因為:(1)羥基磷灰石/聚合物納米復合材料的研究表明 p2p結合能發生變化。29-31(2)更重要的是,盡管元素(如C,N,O源自核和,P2P信號僅僅源自核,因此關文檔實用標準文案注這個信號可以簡化分析。除了P2p信號外，S2p信號被跟蹤觀察硫酸鹽基團在納米復合地層中的參與情況。對于hasc -ca2+- sirna納米復合物，XPS光譜的峰值分別為 285.1、399.4、532.3、134.8、348.0和169.8eV，它們分別被歸為 C1s、N1s、O1s、P2p、Ca2p和S2p。如表1和圖3a中所示，對Ca2+-siRNA納米復合物所獲得的O1s、Ca2p和P2p的結合能的比較表明，HAS-Ca2+siRNA納米復合物的結合能更大，在has-Ca2+-siRNA中(分別為0.2、0.2和0.9eV)。之前報道了羥基磷灰石/聚合物納米復合材料向更高結合能的轉變。29-31所以,觀察到的變化表明,在HAS-Ca2+siRNAnanocomplexes,Ca2+核之間的化學鍵形成 nanocomplex 和。為了更好地了解形成的化學鍵類型，納米復合物的p2p光譜被解壓到雙峰(圖3b,c)。對于Ca2+-sirna 納米復合物，在B的p2p3/2中，一種磷鍵。由于磷酸鈣的形成，檢測到的 E為133.8eV。在hasca2+-sirna納米復合物中，發現了兩種新型的磷鍵 :第一個p2p3/2 為133.8eV，第二個為134.9eV，比例為60:40。這些結果表明,添加Ca2+sirnananocomplex可能導致重排在粒子表面,導致再現的P2p3/2信號133.8eVPO43-。134.9eV的第二個p2p3/2信號是由硫酸鹽基團(聚合物的)與橋接Ca2+離子之間的靜電相互作用產生的。這種靜電相互作用使磷酸鹽環境的電負性更強，使2p2p結合能轉化為更高的結合能，從而確定了通過Ca2+離子連接的三元納米復合物的形成。在co組裝的納米復合材料的參與進一步得到了S2p信號的檢測，這是表面組成部分(圖3b)的一部分，其結合能對應于硫酸鈣組的鈣的結合。32、33合在一起，XPS檢測到的沉積納米復合物表面的所有這些變化都證實了siRNA、文檔實用標準文案Ca2+和HAS之間形成了三元復合物。■總結納米復合物的表面化學成分對細胞內的藥物釋放有很大的影響， 與周圍環境的相互作用，最終決定了細胞和組織對納米復合物的吸收的數量和途徑。因此，獲取有關其表面組成的信息是至關重要的， 以便更好地了解表面化學 /性質關系，并促進納米復合發展作為一種運載工具。這里提出的協議允許傳統的 XPS在樣品由吸濕材料組成的情況下，研究納米復合物的表面組成和化學鍵的變化， 而在某些情況下，如 cryo-XPS 不易獲得。XPS數據與其他互補方法的數據相結合，如x射線衍射(XRD)、FTIR和NMR光譜學，提供了關于納米復合材料的綜合信息。 與其他方法相比，XPS的潛在優勢使其成為首選的選擇方法。本文提供的協議,表明相對比較小的樣本數量(μL)是必需的。利用本協議中所規定的協議，在將樣品引入UHV室之前，可以很容易地制備出測試樣品，并有可能引入污染。此外，通過UHV的溶劑蒸發，避免了經常與凍干樣品凍干有關的污染。最重要的是，盡管在諸如FTIR這樣的技術中，由于信號重疊，有時無法檢測到功能組/鍵的變化，但在XPS中，這種情況不會發生。然而，XPS也有一些局限性。該方法僅在無束縛溶劑蒸發后， 對樣品的表面化學有深入的了解;由于水的損失，樣品表面的變化不能被推翻。值得注意的是(1)樣品必須與UHV兼容;(2)樣品中元素的原子濃度檢查必須在檢出限 (根據元素時,值的順序通常是～0.2%原子百分比);并且(3)在檢測的納米復合成分必須存在于沉積樣品的表面(10個nmoutermost 層)。綜上所述，通過適當的協議，XPS分析可以為納米復合物的表面組成提供有文檔實用標準文案價值的信息。在我們的例子中， XPS在加入其他組分后檢測到 p2p結合能的變化，從而證實了二元和三元納米復合物的形成。■相關內容年代支持信息支持是免費的在 ACS 出版物網站 DOI:10.1021 /acsbiomaterials.7b00040 。視頻描述(PDF)視頻S1，晶圓切割演示(00:05)和支架準備(AVI)視頻S2，樣品沉積示范(00:05)，UHV條件下蒸發樣品干燥(0:30)，XPS測量采集(1:48)，XPS數據處理和分析(2:00)(AVI)■作者信息相應的作者電子郵件:korin@post.bgu.ac.il 。ORCIDEfrat華忻辦公:0000-0002-9040-7781注意作者聲明沒有任何競爭性的經濟利益。■致謝以色列國家納米技術計劃 (INNI)的重點技術區域計劃 (INNI)(用于亞細胞靶向療法的生物啟發納米技術 )支持這項工作。S.C.擁有克萊爾和哈羅德·奧希里教授的生物技術講座教授。■引用文檔實用標準文案張x;Cresswell,M。第三章無機控制釋放的材料特性。無機可控釋放技術;Butterworth-Heinemann: 波士頓,2016;57-91頁。瓦特，j.f.x射線光電子能譜在法醫學中的應用潛力。沖浪。接口肛門。2010年,42(5),358-362。耿,美國;張,美國;Onishi,h.XPS在薄膜研究中的應用。板牙。拋光工藝。2002年,17(4),234-240。(4)Petrovykh,d.y.;Kimura-Sudah;Tarlovm.j.; 用x射線光電子能譜對DNA薄膜的定量表征。2004年朗繆爾,20(2),429-440。(5)deLuca,a.c.;史蒂文斯,j·s·;施羅德,s.l.m.;Guilbaud,j ·b·;Saiani,a;唐斯,美國;Terenghi,g .固定 cell-binding 肽poly-ε-caprolactone 電影表面上biomimic 周圍神經系統。j.生物醫學。板牙。Res。,2013,101(2),491 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