標準解讀

《GB/T 40257-2021 桃拉綜合征診斷規程 RT-PCR檢測法》是一項國家標準，旨在為桃拉綜合征（Taura Syndrome, TS）的診斷提供基于RT-PCR技術的方法指導。桃拉綜合征是一種對蝦類動物具有高度傳染性和致命性的病毒性疾病，該標準通過詳細規定了使用逆轉錄聚合酶鏈反應（RT-PCR）技術來檢測引起此病的桃拉綜合征病毒（Taura Syndrome Virus, TSV），從而幫助快速準確地識別受感染個體或群體。

該標準首先介紹了適用范圍，明確指出其適用于所有疑似受到TSV感染的對蝦樣本，并且可以用于實驗室環境下的常規監測與研究目的。接著，文件列出了引用文件列表，這些文件對于理解本標準內容及執行相關操作至關重要。

在術語和定義部分，標準定義了幾個關鍵概念如“桃拉綜合征”、“桃拉綜合征病毒”等，以確保使用者之間關于疾病及其病原體的理解一致。此外，還提供了有關實驗材料、試劑準備的具體要求，包括但不限于核酸提取方法、引物設計原則以及陽性對照的選擇等信息，這些都是成功實施RT-PCR檢測所必需的知識點。

接下來是詳細的實驗步驟說明，從樣品采集到最終結果分析都給出了具體的操作指南。這其中包括如何正確處理生物樣本以避免交叉污染；如何選擇合適的RNA提取方法并進行有效的逆轉錄過程；以及如何設置適當的PCR循環條件來保證擴增效率同時減少非特異性產物產生等問題。此外，標準還強調了質量控制的重要性，建議采用內部對照系統來監控整個實驗流程的有效性，并提出了一些可能影響實驗結果的因素及解決策略。


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  • 現行
  • 正在執行有效
  • 2021-05-21 頒布
  • 2021-12-01 實施
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文檔簡介

ICS6502030

CCSB.41.

中華人民共和國國家標準

GB/T40257—2021

桃拉綜合征診斷規程RT-PCR檢測法

Codeofdiagnosisforinfectionwithtaurasyndromevirus—RT-PCRmethod

2021-05-21發布2021-12-01實施

國家市場監督管理總局發布

國家標準化管理委員會

GB/T40257—2021

前言

本文件按照標準化工作導則第部分標準化文件的結構和起草規則的規定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

請注意本文件的某些內容可能涉及專利本文件的發布機構不承擔識別專利的責任

。。

本文件由中華人民共和國農業農村部提出

。

本文件由全國水產標準化技術委員會歸口

(SAC/TC156)。

本文件起草單位中國水產科學研究院黃海水產研究所全國水產技術推廣總站

:、。

本文件主要起草人萬曉媛楊冰黃倢李清史成銀張鋒宋曉玲余衛忠張慶利李晨許華

:、、、、、、、、、、、

劉莉

。

Ⅰ

GB/T40257—2021

桃拉綜合征診斷規程RT-PCR檢測法

1范圍

本文件規定了桃拉綜合征診斷規程中普遍適用的核酸檢測技術的要求針對桃拉綜合征病毒

,

給出了檢測法所需試劑或材料儀器設備樣品試驗步驟和

(taurasyndromevirus,TSV),RT-PCR、、、

結果判定

。

本文件適用于對蝦各生活期樣品中帶毒情況的定性檢測以進行桃拉綜合征的流行病學調

TSV,

查診斷檢疫和監測

、、。

2規范性引用文件

下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款其中注日期的引用文

。,

件僅該日期對應的版本適用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于

,;,()

本文件

。

白斑綜合征診斷規程第部分組織病理學診斷法

GB/T28630.4—2012(WSD)4:

3術語和定義

本文件沒有需要界定的術語和定義

。

4縮略語

下列縮略語適用于本文件

。

堿基對

bp:(basepair)

互補脫氧核糖核酸

cDNA:(complementaryDNA)

焦碳酸二乙酯

DEPC:(diethypyrocarbonate)

脫氧核糖核酸

DNA:(deoxyribonucleicacid)

脫氧核糖核苷三磷酸

dNTPs:(deoxy-ribonucleosidetriphosphate)

溴化乙錠

EB:(ethidiumbromide)

乙二胺四乙酸

EDTA:(ethylenediaminetetraaceticacid)

莫洛尼鼠白血病病毒

M-MLV:(moloney-murineleukeminvirus)

聚合酶鏈式反應

PCR:(polymerasechainreaction)

核糖核酸

RNA:(ribonucleicacid)

逆轉錄聚合酶鏈式反應

RT-PCR:-(reversetranscription-polymerasechainreaction)

Taq水生棲熱菌

:(thermusaquaticus)

三羥甲基氨基甲烷

Tris:

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