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細菌的接種和注意事項終極第一頁,共33頁。(優選)細菌的接種和注意事項終極版第二頁,共33頁。第三頁,共33頁。滅菌接種環1.要充分滅菌接種環,以免污染其標本。2.要適當冷卻再取標本,以免帶不出標本中的菌種。第四頁,共33頁。第五頁,共33頁。取標本1.蘸取標本時應適量,以免標本太少漏檢。2.液體標本,如尿液,應注意混勻。第六頁,共33頁。接種1.細菌的接種方法有很多,如平板劃線法、斜面接種法、穿刺接種法,等等。但我們用的最多的是:★平板劃線法—意義指把混雜在一起的微生物,用接種環在平板培養基表面,通過分區劃線,稀釋得到較多的獨立分布的單個菌落,即將樣本在固體培養基表面多次做由點到線稀釋而達到分純的目的。第七頁,共33頁?!镆粎^:所占區域大約是平板面積的1/5~1/4二區:由一區向二區帶出三四條平行線三區:由二區引出三四次,但三區面積最大第八頁,共33頁。第九頁,共33頁。CO2在細菌培養中的意義第十頁,共33頁。1有些細菌在初次分離培養時,需要5﹪-10﹪的CO2。因為細菌在生長過程中能夠分解培養基中的某些含氮物質產生氮,對該菌有殺滅作用,而CO2能中和細菌產生的氮,以減少對細菌的毒性。如腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、牛布魯菌等。

2.為細菌提供碳源,促進細菌的生長。如肺炎鏈球菌,草綠色鏈球菌。在細菌室的培養箱上有一個CO2的開關,為什么要用CO2呢?第十一頁,共33頁。常見細菌的鑒別及其特點第十二頁,共33頁。陽性球菌葡萄球菌---金黃色葡萄球菌第十三頁,共33頁。金葡特點是人類化膿性感染最常見的病原菌,可以引起局部感染,也可以引起全身感染。血漿凝固酶,陽性。血平板上呈黃色菌落,大而凸起,表面光滑,有β溶血環。G+陽性球菌,葡萄狀排列,無芽孢,無莢膜。1.2.3.4.第十四頁,共33頁。葡萄球菌---表面葡萄球菌第十五頁,共33頁。表葡特點正常存在于人體皮膚、黏膜表面,多見于院內感染,如體內異物留置,靜脈導管等血漿凝固酶,陰性表葡形態同金葡相似,但是為白色、扁平菌落,無溶血環1.2.3.3.第十六頁,共33頁。鏈球菌

常見的鏈球菌主要有化膿性鏈球菌、草綠色鏈球菌、肺炎鏈球菌。

根據抗原結構不同可以把鏈球菌分為A、B、C、D等二十個群,但對人類有致病性的大多數屬于A群,少量屬于B群。第十七頁,共33頁。根據在血平板上溶血分為以下三種:甲型(α型)溶血性鏈球菌,又稱草綠色鏈球菌,菌落周圍有草綠色溶血環,致病力弱,是條件致病菌。乙型(β型)溶血性鏈球菌,產生強烈的溶血毒素,在血平板上可使菌落周圍出現2~4mm的無色透明溶血環。丙型(r-)鏈球菌,菌落周圍無溶血環,又叫不溶血性鏈球菌,通常不致病。

第十八頁,共33頁。肺炎鏈球菌菌落特點:在血平板上0.5~1.5mm,灰白色半透明,表面光滑,扁平,周圍環繞草綠色溶血環,培養放置24h以上的菌落,還會因為產生自溶酶的作用,而致菌落中央塌陷而邊緣隆起,呈臍窩狀。第十九頁,共33頁。肺炎鏈球菌、A群、B群的區分:

Opt試驗抑菌環>14,鑒定為肺鏈+桿菌肽試驗-+-A群CAMP試驗+B群第二十頁,共33頁。Opt實驗第二十一頁,共33頁。桿菌肽實驗第二十二頁,共33頁。11第二十三頁,共33頁。葡萄球菌與鏈球菌的鑒別:1.涂片—涂片革蘭染色,葡萄球菌呈葡萄串樣,鏈球菌呈鏈狀。2.M-H試驗—當染片不能區別時,接種到M-H平板,長成菌落之后,可挑單個菌落做觸酶試驗,+是葡萄球菌,-是鏈球菌。第二十四頁,共33頁。腸球菌腸球菌屬特點:G+,成圓球形或橢圓形,單個,成對,或短鏈,均可。在血平板上可形成灰白色不透明表面光滑,0.5~1.0mm大小的菌落,可有溶血現象。第二十五頁,共33頁。以糞腸球菌和屎腸球菌為常見:阿拉伯糖山梨醇屎腸球菌陽性陰性糞腸球菌陰性陽性

第二十六頁,共33頁。陰性桿菌大腸桿菌:G-桿菌,有鞭毛、菌毛,無芽胞。菌落2~3mm,圓形凸起,灰白濕潤,光滑半透明,邊緣整齊。某些菌落可產生有透明溶血環。第二十七頁,共33頁。鮑曼不動桿菌菌落特點:圓形、凸起光滑、邊緣整齊不透明、灰白色有粘性的菌落多數菌落不溶血在中國蘭上為粉紅色菌落第二十八頁,共33頁。菌落特點:較大菌落、凸起、灰白色黏液型、相鄰菌落容易發生融合可挑出長絲狀細絲肺炎克雷伯桿菌

第二十九頁,共33頁。變形桿菌遷徙生長菌落特點:G-,兩邊鈍圓,有明顯的多形性,呈球形或絲狀,無芽胞無莢膜,有鞭毛,運動活潑。普通變形桿菌和奇異變形桿菌的大多數菌株呈遷徙擴散生長,迅速彌漫。波紋狀薄膜布滿整個培養基表面。第三十頁,共33頁。嗜麥芽假單胞菌菌落特點:G-桿菌,細長略彎曲。不透明,灰黃色菌落,在血平板上可產生氨味。本菌氧化酶陰性,與大多數假單胞菌不同。第三十一頁,共33頁。在普通瓊脂培養基上能

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