《單克隆丙種球蛋白血癥實驗室診斷指南》

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T/CGSS

中華人民共和國衛生團體標準

T/CGSS007—2018

單克隆丙種球蛋白血癥實驗室診斷指南

Guidesofthediagnosisformonoclonalgammopathiesinclinicallaboratories

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發布

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單克隆丙種球蛋白血癥實驗室診斷指南

Guidesofthediagnosisformonoclonalgammopathiesin

clinicallaboratories

1范圍

本標準規定了單克隆丙種球蛋白血癥實驗室診斷的方法，即實驗組合、檢測流程及結果的判斷方法

和解讀、結果的報告方式等。

本標準適用于臨床實驗室和商業實驗室對單克隆丙種球蛋白血癥的診斷。

2術語和定義

下列術語和定義適用于本文件

2.1

單克隆丙種球蛋白Monoclonalgammaglobulin（M蛋白）

是B淋巴細胞或漿細胞單克隆性增殖而大量產生的在類別、亞類、型、亞型上相同的均一免疫球蛋

白或免疫球蛋白片段（如輕鏈或重鏈），這種均一蛋白質的氨基酸順序、空間構象和電泳特性皆相同且

沒有正常生理功能。

2.2

單克隆丙種球蛋白血癥Monoclonalgammopathies

血液或尿液中含有單克隆免疫球蛋白或其片段（如單克隆輕鏈或重鏈）

2.3

本周蛋白Bence-Jonesprotein

單克隆游離輕鏈κ或λ

2.4

雙M蛋白Doublegammaglobulin

來自一個惡變的漿細胞克隆，輕鏈型相同的兩種M蛋白，如IgMκ和IgGκ。

2.5

雙克隆免疫球蛋白Biclonalgammaglobulin

來自兩個惡變的漿細胞克隆，輕鏈型不同的兩種M蛋白，如IgGλ和IgAκ。

2.6

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寡克隆條帶Oligoclonalband,OCB

某幾個克隆的漿細胞異常增殖，其合成的免疫球蛋白增多，在電泳時出現幾個狹窄的不連續的條帶。

常見于漿細胞病治療后、自身免疫病和感染。

2.7

免疫球蛋白聚合體Immunoglobulinpolymer

免疫球蛋白單體通過二硫鍵連接形成不同聚合度的聚合體

2.8

輕鏈聚合體Lightchainspolymer

游離輕鏈單體通過二硫鍵連接形成不同聚合度的聚合體

2.9

非特異性結合Nonspecificbinding

抗原與非特異性抗體的結合。

2.10

伴隨輕鏈Excesslightchains

惡變的漿細胞除產生完整的M蛋白外，由于其輕鏈合成速度比重鏈快，會產生不能與重鏈結合的游

離輕鏈，此為伴隨輕鏈，其性質為同一個惡變的漿細胞克隆產生的單克隆游離輕鏈。

2.11

單克隆輕鏈Monoclonalfreelightchains

惡變的漿細胞產生的未與重鏈結合的輕鏈

2.12

單克隆重鏈Monoclonalfreeheavychains

惡變的漿細胞產生的未與輕鏈結合或由于結構不完整不能與輕鏈結合的重鏈

2.13

重鏈降解產物Degradationproductofheavychains

免疫球蛋白重鏈分解形成的降解產物

2.14

漿細胞反應性增殖Reactiveproliferationofplasmacyte

機體對外來抗原產生的正常體液免疫反應，針對該抗原產生抗體的某些漿細胞克隆增殖。

2.15

治療性單抗藥物Monoclonalantibodytherapy

2

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治療用的人源化單克隆抗體，通過與相應抗原的結合干預疾病發生、發展過程中的各個通路，如CD20

單抗和CD38單抗等等。

2.16

血清蛋白電泳Serumproteinelectrophoresis，SPE

血清蛋白在凝膠或毛細管介質中按照其所帶電荷的性質和數量電泳分離成五至六個組分，分別是白

蛋白、α1球蛋白、α2球蛋白、β球蛋白（β1球蛋白和β2球蛋白）和γ球蛋白，經過光密度掃描后對

每一個蛋白組分進行半定量檢測即每一個蛋白組分的電泳峰面積占所有蛋白峰面積的百分比。

2.17

血清免疫固定電泳Serumimmunofixationelectrophoresis，sIFE

血清蛋白在凝膠介質中分六個泳道進行電泳分離，然后每個泳道加入不同的抗體或固定液與血清中

的相應蛋白質結合并發生沉淀（其順序為蛋白固定液、γ重鏈抗體、α重鏈抗體、μ重鏈抗體、κ輕鏈

抗體、λ輕鏈抗體），清洗掉未結合蛋白后進行蛋白染色。

2.18

尿免疫固定電泳Urineimmunofixationelectrophoresis，uIFE

尿蛋白在凝膠介質中分六個泳道進行電泳分離，然后每個泳道加入不同的抗體或固定液與尿液中的

相應蛋白質結合并發生沉淀（其順序為蛋白固定液、γαμ重鏈混合抗體、κ輕鏈抗體、游離κ輕鏈抗

體、λ輕鏈抗體、游離λ輕鏈抗體），清洗掉未結合蛋白后進行蛋白染色。

2.19

血清輕鏈測定Serumlightchain，sLC

采用免疫化學法測定血清中的輕鏈κ和λ，該輕鏈為免疫球蛋白上的輕鏈和游離輕鏈的和。

2.20

血清游離輕鏈（比）測定Serumfreelightchain（ratio），sFLC(r)

采用免疫化學方法測定血清中的游離輕鏈κ和λ，并計算二者的比值。

2.21

尿蛋白電泳Urineproteinelectrophoresis,uPE

尿蛋白在凝膠介質中電泳，按照其所帶電荷的性質和數量進行分離。

2.22

尿輕鏈測定Urinelightchain，uLC

采用免疫化學法測定尿液中的輕鏈κ和λ，該輕鏈為免疫球蛋白上的輕鏈和游離輕鏈的和。

3總則

3.1單克隆丙種球蛋白血癥的發病機理

3

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由于染色體易位和骨髓微環境的變化，造成克隆性漿細胞異常增殖，產生大量的可以在血液或尿液

中檢測到的單克隆免疫球蛋白或單克隆輕鏈或重鏈，與多種漿細胞病相關，如多發性骨髓瘤（MM）及其

亞型如冒煙型骨髓瘤（SMM）、骨硬化性骨髓瘤（POEMS綜合征）以及華氏巨球蛋白血癥（WM）、重鏈病

和免疫球蛋白沉積癥（原發性淀粉樣變性、輕鏈沉積病）等。沒有相應的臨床癥狀同時M蛋白濃度較低

時被定義為意義未明的單克隆免疫球蛋白血癥（MGUS）。

3.2單克隆丙種球蛋白血癥診斷與相關漿細胞病的診治

對于相關漿細胞病的診斷、疾病分期、療效評估具有重要作用

3.3單克隆丙種球蛋白血癥實驗室診斷的基本方法

進行血清和尿液的相關檢查，包括血清和尿免疫固定電泳（定性），血清和尿蛋白電泳/尿輕鏈定

量（定量），血清游離輕鏈比測定（定性和定量），根據實驗結果判斷血液和尿液中是否含有M蛋白。

4單克隆丙種球蛋白檢測方法

4.1血清單克隆丙種球蛋白檢測方法

4.1.1定性方法

一般情況下，血清免疫固定電泳免疫球蛋白泳道出現致密條帶為M蛋白陽性結果，免疫球蛋白呈均

勻彌散分布則為陰性結果，同時在兩個輕鏈泳道和不同的重鏈泳道出現兩條以上的條帶為寡克隆蛋白。

4.1.2定量方法

在血清蛋白電泳掃描圖譜γ區域出現高而窄的峰型，可以判斷為M蛋白。α2、β區域若出現高而窄的

峰型，必須經免疫固定電泳確定后，才可判斷為M蛋白。手動選取M蛋白電泳峰，其峰面積占所有蛋白峰

面積的百分比為半定量結果，也可通過總蛋白濃度計算得到單克隆免疫球蛋白濃度。其計算公式為：單

克隆免疫球蛋白濃度（g/L）=單克隆免疫球蛋白百分比(%)x總蛋白濃度（g/L）。

4.2尿液單克隆丙種球蛋白檢測方法

4.2.1樣品

定性和鑒定采用晨尿，定量采用24h尿。

4.2.2定性方法

尿免疫固定免疫球蛋白泳道出現致密條帶為M蛋白陽性結果，免疫球蛋白呈均勻彌散分布則為陰性

結果。

4.2.3定量方法

4.2.3.1尿蛋白電泳定量

尿蛋白電泳分離尿蛋白，α2-γ區出現致密條帶，通過尿免疫固定電泳進一步確定其M蛋白的性質，

手動選取M蛋白電泳峰，其峰面積占所有蛋白峰面積的百分比為半定量結果，也可通過確定的24h尿總

蛋白濃度計算得到M蛋白濃度。其計算公式為：M蛋白濃度（mg/L）=M蛋白占總蛋白百分比(%)x24h

尿總蛋白濃度（mg/L）,24h尿M蛋白總量（mg/24h）=M蛋白濃度（mg/L）x24h尿量(L)

4.2.3.2尿輕鏈定量

4

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24h尿輕鏈總量（mg/24h）=尿κ或λ濃度（mg/L）x24h尿量（L）

5單克隆丙種球蛋白檢測流程和鑒定

5.1單克隆丙種球蛋白檢測流程圖（附錄E）

5.2血清單克隆丙種球蛋白鑒定

5.2.1基本原則

通過致密條帶所在的泳道判斷單克隆免疫球蛋白的類和型，如在蛋白固定液泳道、γ重鏈泳道和κ

泳道同時出現致密條帶，且三個泳道的條帶在同一水平線上，則此M蛋白的類型為IgGκ。

5.2.2特殊情況的判斷和處理

5.2.2.1IgD或IgE類型的M蛋白

如僅在蛋白固定液泳道和輕鏈κ或λ泳道出現致密條帶，則須增加δ重鏈和ε重鏈抗體，如在蛋白

固定液泳道δ重鏈泳道和λ泳道同時出現致密條帶，且三個泳道的條帶在同一水平線上，則此M蛋白類

型為IgDλ；若重鏈泳道均未出現條帶，則此M蛋白為不完整的免疫球蛋白輕鏈。

5.2.2.2完整M蛋白同時含伴隨輕鏈

輕鏈泳道出現兩個條帶，一個與某個重鏈泳道相對應，另一個不與任何重鏈泳道相對應，則M蛋白

為完整的免疫球蛋白和單克隆游離輕鏈，一般情況下該單克隆游離輕鏈是同一克隆的漿細胞產生的未與

重鏈結合的游離輕鏈。

5.2.2.3出現雙M蛋白

5.2.2.4出現雙克隆免疫球蛋白

5.2.2.5免疫球蛋白聚合體形成多個條帶

一個重鏈泳道和一個輕鏈泳道同時出現二到三條相對應的條帶，此為形成了不同聚合度的M蛋白聚

合體，常見于IgA類型的M蛋白，此M蛋白是一個克隆的漿細胞產生的。

5.2.2.6輕鏈比例嚴重失衡但血清免疫固定電泳無致密條帶

血清免疫固定電泳一個輕鏈泳道深染，而另一個輕鏈泳道幾乎不被染色，但無致密條帶，此為不同

聚合度的M蛋白沒有分離或M蛋白濃度過高，常見于IgA類型的M蛋白。

5.2.2.7輕鏈條帶缺失

重鏈泳道出現明顯的致密條帶，對應位置不出現輕鏈條帶。此為M蛋白空間構型的改變造成輕鏈的

結合位點被遮蓋或部分遮蓋，不能與輕鏈抗體結合形成單克隆條帶，常見于IgA和IgD類的M蛋白。

5.2.2.8輕鏈條帶缺失的處理

采用更敏感的尿免疫固定電泳的方式進行測定，血清標本需要進行10倍稀釋。

5.2.2.9條帶中間未著色

抗原濃度過高

5

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5.2.2.10條帶中間未著色的處理

血清高倍稀釋后，再進行血清免疫固定電泳，或直接按照未著色的泳道報結果。

5.2.2.11出現非特異結合條帶

特異結合的泳道條帶很深而非特異性結合的泳道條帶較淺，但條帶的電泳位置都相同。

5.2.2.12非特異性結合條帶的處理

血清用生理鹽水進行1:1稀釋后，再進行血清免疫固定電泳，或直接讀取特異結合的條帶。

5.2.2.13大分子蛋白堵塞凝膠孔

用終濃度為2-3%的β-巰基乙醇處理血清標本20min，再進行血清免疫固定電泳。

5.2.2.14分離不良

兩種M蛋白電泳遷移率相同，沒有得到良好分離。

5.2.2.15分離不良的處理

直接報告兩種蛋白。

5.2.2.16單克隆重鏈

血清免疫固定電泳在重鏈抗體泳道出現較寬的密集條帶，而在輕鏈泳道相應位置不出現條帶。

5.2.2.17單克隆重鏈的確定

通過尿免疫固定電泳確定尿液中含有單克隆重鏈，而無完整的M蛋白和單克隆輕鏈。

5.2.2.18某些克隆反應性增殖

血清免疫固定電泳輕鏈κ和λ泳道均出現弱的條帶，且不出現某一種免疫球蛋白明顯升高，而其他

免疫球蛋白明顯降低的情況。或免疫球蛋白IgG多克隆顯著升高，同時IgM出現弱的致密條帶。

5.2.2.19某些克隆反應性增殖的確定

結合臨床資料和其他實驗結果或與臨床醫生溝通后綜合判斷

5.3尿液單克隆丙種球蛋白鑒定

5.3.1基本原則

通過致密條帶所在的泳道判斷是否存在本周蛋白或完整的單克隆免疫球蛋白，如在蛋白固定液泳道、

輕鏈λ泳道和游離輕鏈λ泳道同時出現致密條帶，且三個泳道的條帶在同一水平線上，則此M蛋白為本

周蛋白λ。

5.3.2特殊情況的判斷和處理

5.3.2.1只在總輕鏈泳道出現條帶

因免疫球蛋白重鏈、輕鏈、游離輕鏈抗體與免疫球蛋白的結合能力遞減，故此為本周蛋白陽性，無

完整M蛋白。

6

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5.3.2.2輕鏈的聚合

輕鏈聚合后電泳條帶呈現彌散狀，但兩型的輕鏈比例嚴重不平衡，如全部為輕鏈κ，而λ缺如。或

對照泳道出現致密條帶，而其他泳道的相應位置全部呈彌散狀。

5.3.2.3聚合輕鏈的處理

用終濃度為2-3%的β-巰基乙醇處理尿液標本20min，然后再進行電泳。

5.3.2.4條帶中間未著色

抗原濃度過高

5.3.2.5條帶中間未著色的處理

尿液稀釋后，再進行尿免疫固定電泳，或直接按照未著色的泳道報結果。

5.3.2.6非特異性結合

所有泳道均出現條帶，但某兩個泳道蛋白染色更深或出現著色空缺。

5.3.2.7非特異性結合的處理

將標本進行稀釋后重新電泳，或直接按照蛋白染色深的泳道報結果。

5.3.2.8分離不良

對照、重鏈、輕鏈、游離輕鏈泳道均出現條帶，且在一個水平線上，此為完整M蛋白與游離輕鏈在

此分析系統中不能分離。

5.3.2.9分離不良的處理

直接報告完整M蛋白和本周蛋白陽性。

5.3.2.10出現重鏈降解產物

尿液中出現與輕鏈泳道不匹配的條帶。

5.3.2.11單克隆重鏈

對照和重鏈泳道出現致密條帶，輕鏈泳道對應位置不出現條帶。

6單克隆丙種球蛋白檢測的分析中質量控制

6.1定性方法和鑒定

定期做質控，確保免疫固定電泳所用抗體的有效性。

6.2定量方法

血清蛋白電泳、尿蛋白電泳及血清總蛋白、尿總蛋白定量、尿輕鏈定量、IgD、IgE定量等，均應在

質控通過后再進行測定。如質控不通過，應從儀器、試劑、質控品及操作等方面查找原因，處理完成后

再進行測定。

7

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7單克隆丙種球蛋白的報告

7.1定性實驗

7.1.1基本原則

明確報告M蛋白是否為陽性，陽性結果須報告M蛋白類型，不能以對電泳圖譜的描述代替明確的結論。

7.1.2電泳結果不確定時結果的報告

7.1.2.1血清免疫固定電泳單個輕鏈泳道出現不確定的弱條帶

通過尿免疫固定電泳實驗或血清游離輕鏈比判斷是否存在本周蛋白，如本周蛋白陰性，則血清免疫

固定電泳應報告為陰性。

7.1.2.2血清免疫球蛋白升高但無法通過血清免疫固定電泳判斷其性質

進行血清輕鏈測定，或者直接通過血清免疫固定電泳的兩個輕鏈泳道的染色情況確定輕鏈比例是否

失衡，判斷免疫球蛋白是否具有單克隆性質。

7.1.2.3輕鏈缺失

用敏感度高的尿免疫固定電泳方法檢測高倍稀釋的血清，確定M蛋白的型，報告完整的M蛋白類型，

如IgAλ。

7.1.2.4出現單克隆重鏈

應結合臨床加以確定，結果報告為：x重鏈M蛋白陽性，如γ重鏈M蛋白陽性。

7.1.2.5出現寡克隆條帶

結果報陰性或加備注說明“可見寡克隆條帶”

7.1.2.6某些克隆反應性增生

結果報陰性

7.1.2.7無法確定電泳條帶的性質

結果報M蛋白可疑陽性

7.1.2.8治療性單抗藥物干擾

與臨床溝通確認后結果注明存在治療性單抗干擾

7.2定量實驗

7.2.1基本原則

以占總蛋白百分比（%）和/或濃度（g/L）報告定量結果，患者的血清蛋白電泳M蛋白峰選取方式應

前后一致。

7.2.2M蛋白與其他非免疫球蛋白無法完全分離時的定量結果報告

報告注明M蛋白為近似定量結果

8

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7.2.3M蛋白與其他非免疫球蛋白完全無法分離時的定量結果報告

報告注明M蛋白無法定量

7.3質量保證

電泳圖譜不確定時應結合臨床或綜合相關實驗室檢測結果及患者的治療干預等情況進行綜合分析

判斷，必要時應與臨床醫生溝通。

9

T/×××××××—××××AA

附錄A

（資料性附錄）

血清免疫固定電泳一般圖譜

a)b)

c)

圖A.1

SP泳道加入蛋白固定液，G泳道加入免疫球蛋白γ重鏈抗體，A泳道加入免疫球蛋白α重鏈抗體，M

泳道加入免疫球蛋白μ重鏈抗體，κ泳道加入κ輕鏈抗體，λ泳道加入λ輕鏈抗體。

圖A.1a)血清免疫固定電泳M蛋白陽性圖譜

圖A.1b)血清免疫固定電泳M蛋白陰性圖譜

圖A.1c)血清免疫固定電泳寡克隆免疫球蛋白陽性圖譜

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T/×××××××—××××BB

附錄B

（資料性附錄）

血清免疫固定電泳特殊圖譜

a)b)

c)d)

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e)f)

g)h)

i)j)

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k)

圖B.1

SP泳道加入蛋白固定液，G泳道加入免疫球蛋白γ重鏈抗體，A泳道加入免疫球蛋白α重鏈抗體，M

泳道加入免疫球蛋白μ重鏈抗體，κ泳道加入κ輕鏈抗體，λ泳道加入λ輕鏈抗體。

圖B.1a)完整M蛋白同時含有伴隨輕鏈，本例為IgGκ同時含有伴隨輕鏈κ。

圖B.1b)免疫球蛋白聚合體，本例M蛋白為IgAλ。

圖B.1c)輕鏈條帶缺失

圖B.1d)條帶中空，本例M蛋白為IgAκ。

圖B.1e)非特異性結合，本例M蛋白為IgGλ。

圖B.1f)大分子堵塞凝膠孔

圖B.1g)分離不良，本例為IgAκ和IgGλ雙克隆。

圖B.1h)單克隆重鏈，本例M蛋白為γ重鏈。

圖B.1i)和圖B.1j)某些克隆反應性增加

圖B.1k)雙克隆M蛋白，本例為IgMκ和IgMλ。

13

T/×××××××—××××CC

附錄C

（資料性附錄）

尿免疫固定電泳一般圖譜

a)b)

圖C.1

ELP泳道加入蛋白固定液，GAM泳道加入重鏈γ、α、μ抗體混合液，K泳道加入輕鏈κ抗體，L泳道

加入輕鏈λ抗體，Kf泳道加入游離輕鏈κ抗體，Lf泳道加入游離輕鏈λ抗體。

圖C.1a)本周蛋白λ陽性

圖C.1b)本周蛋白λ和完整M蛋白陽性

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T/×××××××—××××DD

附錄D

（資料性附錄）

尿免疫固定電泳特殊圖譜

a)b)

c)d)

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e)f)

g)h)

圖D.1

ELP泳道加入蛋白固定液，GAM泳道加入重鏈γ、α、μ抗體混合液，K泳道加入輕鏈κ抗體，L泳道

加入輕鏈λ抗體，Kf泳道加入游離輕鏈κ抗體，Lf泳道加入游離輕鏈λ抗體。

圖D.1a)只在總輕鏈泳道出現致密條帶,本例為本周蛋白λ陽性。

圖D.1b)圖D.1c)輕鏈的聚合

圖D.1d)條帶中空，本例為本周蛋白λ陽性。

圖D.1e)非特異性結合和條帶中空，本例為本周蛋白λ陽性。

圖D.1f)分離不良，本例為本周蛋白κ和完整M蛋白陽性。

圖D.1g)出現重鏈降解產物，本例為本周蛋白κ和完整M蛋白陽性同時含有重鏈降解產物。

圖D.1h)單克隆重鏈

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T/×××××××—××××EE

附錄E

（規范性附錄）

單克隆丙種球蛋白檢測流程圖

血清蛋白電泳

β和γ區有密集條帶β和γ區無密集條帶

M蛋白劃取定量血清免疫固定電泳

血清免疫固定電泳陽性陰性

鑒定M蛋白類型

IgG/IgA/IgM型輕鏈型

IgD和IgE免疫固定電泳

確認

陽性陰性血清游離輕鏈比測定

IgD/IgE型異常（<0.26或>1.65）正常（0.26-1.65）

尿免疫固定電泳

陽性陰性

M蛋白陽性尿蛋白電泳或M蛋白陰性

尿輕鏈定量

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參考文獻

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