《微生物檢驗技術(shù)培訓(xùn)課程》課件-項目1：微生物檢驗基礎(chǔ)

微生物概述MICROBIALOVERVIEW微生物概述一、微生物概念與種類（一）概念：一類個體微小、結(jié)構(gòu)簡單、肉眼不能直接看見，必須借助光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡才能觀察到的微小生物。一、微生物概念與種類（二）種類分類主要依據(jù)：結(jié)構(gòu)、組成1.非細胞型微生物2.原核細胞型微生物3.真核細胞型微生物1.非細胞型微生物（一）結(jié)構(gòu)組成最為簡單核酸（二）典型代表：病毒衣殼2.原核細胞型微生物單細胞生物。有細胞結(jié)構(gòu)，但細胞核還不完整，沒有核膜、核仁，因此它的核酸呈裸露狀態(tài)。細胞器不完善，僅有核糖體。典型代表：細菌、支原體、衣原體、立克次體、螺旋體和放線菌。3.真核細胞型微生物有細胞結(jié)構(gòu)，細胞核發(fā)育完整。具備了完備的細胞器。典型代表：真菌。一、微生物概念與種類三型八大類（二）種類真核細胞型微生物真菌非細胞型微生物病毒原核細胞型微生物細菌支原體衣原體立克次體螺旋體放線菌二、微生物的特點微生物具有生物所共有的的生命特征，還具有其特有的生命特征，展現(xiàn)了生物學(xué)多樣性。個體小、面積大吸收快、代謝旺食譜雜、繁殖快適應(yīng)強、易變異1234種類多、分布廣5三、微生物的分類和命名（一）微生物生物分類的等級三、微生物的分類和命名（二）細菌的命名---拉丁文雙命名法Escherichiacoli（E.coli）中文譯名：大腸埃希菌屬名種名四、微生物與人類的關(guān)系四、微生物與人類的關(guān)系四、微生物與人類的關(guān)系微生物與人類的關(guān)系微生物概述微生物概念與種類：小、三型八大類微生物的特點微生物的分類和命名：種、屬、拉丁雙名微生物與人類的關(guān)系：多數(shù)有益、少數(shù)有害1234謝謝觀看THANKYOUFORWATCHING微生物檢驗?zāi)切┦翸ICROBIOLOGICALTESTSANDALLTHATSTUFF多數(shù)有益、少數(shù)有害種、屬、拉丁雙名小、三型八大類微生物概述復(fù)習(xí)微生物概念與種類微生物的特點微生物的分類和命名微生物與人類的關(guān)系1234人體內(nèi)正常菌群的分布大腸桿菌、乳桿菌、白念珠菌、類白喉桿菌、非致病性分枝等表皮葡萄球菌、甲，丙型鏈球菌類白喉桿菌、肺炎球菌、奈氏菌、乳桿菌、梭桿菌螺旋體、放線菌、白念珠菌白色葡萄球菌、干燥桿菌葡萄球菌、類白喉桿菌綠膿桿菌、非致病性分枝桿菌大腸桿菌、產(chǎn)氣桿菌、變形桿菌綠膿桿菌、葡萄球菌、厭氧性細菌真菌、乳桿菌，雙歧桿菌等白色葡萄球菌、類白喉桿菌、非致病性分枝桿菌葡萄球菌、甲，丙型鏈球菌肺炎球菌、奈氏菌、類桿菌等葡萄球菌、綠膿桿菌、白念珠菌丙酸桿菌、類白喉桿菌、非致病性分枝桿菌眼結(jié)膜鼻咽腔腸道陰道外耳道口腔皮膚尿道人體內(nèi)正常菌群的分布少數(shù)細菌具有致病性許多細菌具有潛在致病性大多細菌不具有致病性標本采集的質(zhì)量控制微生物檢驗是為臨床診斷、治療和預(yù)防感染性疾病提供實驗依據(jù)，同時擔(dān)負著監(jiān)測、預(yù)防耐藥菌的產(chǎn)生和醫(yī)院感染的發(fā)生責(zé)任的一門應(yīng)用型學(xué)科。兇手是誰？如何治療？如何預(yù)防？二、微生物檢驗的任務(wù)研究感染性疾病的病原體的特征提供快速、準確的病原學(xué)診斷指導(dǎo)臨床合理使用抗菌藥物對醫(yī)院感染進行監(jiān)控1234三、微生物檢驗的流程與技術(shù)標本采集標本接種與培養(yǎng)細菌的鑒定藥物敏感試驗發(fā)出報告（一）傳統(tǒng)微生物檢驗的流程三、微生物檢驗的流程與技術(shù)（二）快速病原學(xué)檢驗技術(shù)的應(yīng)用M-Discoover100微生物質(zhì)譜快速鑒定分析系統(tǒng)四、微生物檢驗的原則（一）確保分析前質(zhì)量標本的正確采集標本的正確運輸和儲存回退不合格標本收集臨床背景及抗菌藥物的使用情況人體內(nèi)正常菌群的分布大腸桿菌、乳桿菌、白念珠菌、類白喉桿菌、非致病性分枝等表皮葡萄球菌、甲，丙型鏈球菌類白喉桿菌、肺炎球菌、奈氏菌、乳桿菌、梭桿菌螺旋體、放線菌、白念珠菌白色葡萄球菌、干燥桿菌葡萄球菌、類白喉桿菌綠膿桿菌、非致病性分枝桿菌大腸桿菌、產(chǎn)氣桿菌、變形桿菌綠膿桿菌、葡萄球菌、厭氧性細菌真菌、乳桿菌，雙歧桿菌等白色葡萄球菌、類白喉桿菌、非致病性分枝桿菌葡萄球菌、甲，丙型鏈球菌肺炎球菌、奈氏菌、類桿菌等葡萄球菌、綠膿桿菌、白念珠菌丙酸桿菌、類白喉桿菌、非致病性分枝桿菌眼結(jié)膜鼻咽腔腸道陰道外耳道口腔皮膚尿道四、微生物檢驗的原則標本采集標本接種與培養(yǎng)細菌的鑒定藥物敏感試驗發(fā)出報告（三）保證檢驗質(zhì)量四、微生物檢驗的原則結(jié)合病情分析檢驗結(jié)果，觀察是否符合病人的臨床癥狀。（四）微生物定性、定量、定位分析定位分析條件致病菌致病菌排除污染，有臨床意義有臨床意義無菌部位定性分析有菌部位定性分析超過一定量有臨床意義條件致病菌致病菌定量分析有臨床意義四、微生物檢驗的原則（五）加強與臨床聯(lián)系推測性診斷實驗結(jié)果，專業(yè)咨詢（懂原則）（熟流程、重技術(shù)）（明任務(wù)）微生物檢驗?zāi)切┦挛⑸餀z驗概念微生物檢驗的任務(wù)微生物檢驗的流程與技術(shù)微生物檢驗的原則1234謝謝觀看THANKYOUFORWATCHING細菌的大小與形態(tài)SIZEANDMORPHOLOGYOFBACTERIA什么是細菌？細菌是什么從大的方面來講：細菌指的是原核微生物，即一切原核微生物都可以稱之為細菌。從小的方面來講：細菌主要是指那些形狀為桿狀、球狀、或螺旋狀的單細胞原核微生物。細菌的大小和形態(tài)（一）細菌的大小測量單位：微米（μm）球萄用直徑量度桿菌用長和寬量度螺旋狀菌以其兩端的直線距離作長度和寬量度細菌的大小和形態(tài)（二）細菌形態(tài)弧菌螺菌細菌形態(tài)桿菌螺形菌球菌球菌Coccusbacteria桿菌長桿菌球桿菌芽胞桿菌棒狀桿菌分枝桿菌鏈桿菌單桿茵歡桿菌柵欄樣排列鏈桿菌螺形菌(spiralbacterium)弧菌螺菌感謝觀看THANKYOUFORWATCHING細菌的基本結(jié)構(gòu)THEBASICSTRUCTUREOFBACTERIA基本結(jié)構(gòu)—細胞壁、細胞膜、細胞質(zhì)、核質(zhì)細菌的結(jié)構(gòu)特殊結(jié)構(gòu)—莢膜、鞭毛、菌毛、芽胞一、細胞壁1.化學(xué)組成與結(jié)構(gòu)化學(xué)組成與結(jié)構(gòu)用革蘭染色法可將細菌分為兩大類，即革蘭陽性菌和革蘭陰性菌。革蘭陽性菌胞壁由肽聚糖和磷壁酸組成。革蘭陰性菌胞壁由肽聚糖和外膜組成。共有成分（主要成分、原核生物特有）革蘭陽性菌肽聚糖。聚糖骨架四肽側(cè)鏈五肽交聯(lián)橋三維結(jié)構(gòu)，堅固15~50層。共有成分（主要成分、原核生物特有）革蘭陰性菌肽聚糖。

聚糖骨架四肽側(cè)鏈二維平面，疏松1~3層。磷壁酸——Ｇ+菌特有成分壁磷壁酸-分型膜磷壁酸-粘附外膜——Ｇ-菌特有成分由內(nèi)向外——脂蛋白；脂質(zhì)雙層；脂多糖。脂多糖(LPS)組成及作用：脂質(zhì)A：內(nèi)毒素的毒性部分。核心多糖：屬特異性。特異多糖：O抗原，種特異性。G+菌與G-菌細胞壁的比較細胞壁革蘭陽性菌革蘭陰性菌肽聚糖組成聚糖骨架聚糖骨架

四肽側(cè)鏈四肽側(cè)鏈

五肽交聯(lián)橋

胞壁厚度厚，20-80nm薄，10-15nm肽聚糖層數(shù)可多達50層1-3層肽聚糖含量50%-80%5%-20%堅韌度強弱磷壁酸有無外膜

無有一、細胞壁2.細胞壁的功能細胞壁的功能維持細菌固有形態(tài)，保護細菌抵抗低滲的外環(huán)境。參與物質(zhì)交換。具有免疫原性。與細菌致病性有關(guān)。一、細胞壁3.細菌L型(bacterialLform)

概念：在某些情況下，細菌失去細胞壁而在高滲環(huán)境下仍可存活者稱為L型細菌（細胞壁缺陷型細菌），呈油煎蛋樣菌落。革蘭陽性菌L型稱為原生質(zhì)體，必須生存于高滲環(huán)境中。革蘭陰性菌L型稱為原生質(zhì)球，在低滲環(huán)境中仍有一定的抵抗力。生物學(xué)特性：多形性、革蘭陰性、高滲培養(yǎng)、生長緩慢、荷包蛋樣菌落、可回復(fù)。對作用于細胞壁的抗生素（青霉素類、頭孢菌素類）均耐藥；對干擾蛋白質(zhì)合成的抗生素（如氨基糖苷類、四環(huán)素、氯霉素）敏感。一、細胞壁3.細菌L型(bacterialLform)

多形性荷包蛋樣菌落細菌L型與醫(yī)學(xué)的關(guān)系：有致病性，常引起慢性和反復(fù)發(fā)作的感染二、細胞膜（胞質(zhì)膜）組成：脂質(zhì)雙層，蛋白質(zhì)（無膽固醇）。功能：參與菌體內(nèi)外物質(zhì)交換。參與細胞呼吸過程。參與生物合成。形成中介體。中介體胞膜內(nèi)陷折疊形成的囊狀結(jié)構(gòu)，多見于Ｇ＋菌。功能：參與分裂、呼吸供能、胞壁及芽胞形成。中介體擬染色體三、細胞質(zhì)（細胞漿）成分：無色透明膠狀物，由水、蛋白質(zhì)、脂類、核酸及少量糖和無機鹽組成。功能：細菌新陳代謝的場所。（1）核蛋白體（核糖體）蛋白質(zhì)合成場所某些抗生素作用部位三、細胞質(zhì)（細胞漿）概念：位于胞漿中，細菌染色體外的遺傳物質(zhì)為雙鏈閉合環(huán)狀DNA分子。可攜帶遺傳信息，控制細菌某些特定的遺傳性狀。特點：能自我復(fù)制，可傳給子代或其他細菌非生命活動必需。分類：F、R、Vi質(zhì)粒。（2）質(zhì)粒三、細胞質(zhì)（細胞漿）多為儲存的營養(yǎng)物質(zhì)，如：白喉桿菌的異染顆粒，成分為RNA和多聚偏磷酸鹽，嗜堿性強，著色較深。用特殊染色可染成與菌體不同的顏色，具有鑒別價值。（3）胞漿顆粒（內(nèi)含體）四、核質(zhì)細菌的遺傳物質(zhì)無核膜、核仁，故稱為核質(zhì)或擬核。控制著細菌的主要遺傳性狀，是細菌存活所必需的。感謝觀看THANKYOUFORWATCHING細菌的特殊結(jié)構(gòu)THESPECIALSTRUCTUREOFBACTERIA細菌的特殊結(jié)構(gòu)一、莢膜某些細菌胞壁外包繞一層較厚粘液樣物質(zhì)。≥0.2μm，普通光學(xué)顯微鏡可見，稱為莢膜。<0.2μm微莢膜，必須用電鏡或免疫學(xué)方法證實其存在。一、莢膜1.化學(xué)成分：隨菌種而異多數(shù)細菌：多糖。少數(shù)細菌：多肽（炭疽桿菌）；透明質(zhì)酸（鏈球菌）。2.特點：多數(shù)細菌在生長后期產(chǎn)生。有莢膜的菌落表面光滑、濕潤、具有粘性。莢膜不易著色，可用負染法觀察。一、莢膜3.功能：抗吞噬作用。粘附作用。抗殺傷。免疫原性——鑒別細菌、細菌的分型。抗干燥。與細菌致病有關(guān)二、鞭毛是某些細菌由細胞膜伸出到菌體外的細長彎曲的絲狀物。觀察方法：光學(xué)顯微鏡——特殊染色法。電子顯微鏡。二、鞭毛鞭毛種類——根據(jù)數(shù)目和排列方式分。單毛菌雙毛菌叢毛菌周毛菌二、鞭毛鞭毛作用及意義：細菌的運動器官。某些細菌鞭毛與致病有關(guān)。與細菌鑒別、分型和分類有關(guān)（H抗原）。三、菌毛許多G－菌和個別G+菌菌體表面具有一種比鞭毛細、短而直硬的蛋白絲狀物，與細菌運動無關(guān)，電鏡下才可看見。三、菌毛菌毛的種類和功能：普通菌毛：短、直、多，粘附結(jié)構(gòu)，與致病有關(guān)。性菌毛：長、粗、少，中空管狀，傳遞質(zhì)粒。細菌接合-電鏡照片四、芽胞概念：某些細菌（G+）在一定條件下胞質(zhì)、核質(zhì)濃縮脫水形成一個圓形或卵圓形的小體稱為芽胞。染色特性：芽胞染色。形成條件：惡劣環(huán)境。芽胞特性：保存細菌全部生命活性，但不繁殖，是細菌的休眠體。炭疽芽胞桿菌四、芽胞芽孢的結(jié)構(gòu)四、芽胞芽胞的作用和意義：芽胞的大小、形態(tài)、位置等隨菌種而異。有重要的鑒別價值。芽胞的作用和意義增強細菌抵抗力：水少、厚膜、DPA，殺滅芽胞最有效的方法是高壓蒸汽滅菌法。可成為某些疾病潛在的病源。判斷滅菌效果的指標。鑒別細菌。感謝觀看THANKYOUFORWATCHING細菌的分布DISTRIBUTIONOFBACTERIA學(xué)習(xí)目標掌握正常菌群、條件致病菌的概念1熟悉細菌的分布及其意義2了解微生態(tài)失調(diào)及菌群失調(diào)的臨床意義3嚴格無菌操作細菌在自然界的分布：土壤、水、空氣。細菌在正常人體的分布:體表、腔道（口腔、鼻咽腔、腸道、泌尿生殖道等）。皮膚：表皮葡萄球菌等化膿性感染。口腔：鏈球菌口腔粘膜感染、齲齒。呼吸道：甲型、丙型鏈球菌局部或全身感染。胃腸道：厭氧菌（類桿菌、雙歧桿菌、乳酸桿菌）。泌尿生殖道：葡萄球菌。眼結(jié)膜：偶有表皮葡萄球菌。正常菌群與人體間的相互關(guān)系正常菌群：存在于人體的體表與外界相通的腔道，有著不同種類和一定數(shù)量的微生物，通常對人是無害的。生態(tài)平衡生理意義營養(yǎng)作用（B12、Vk）。免疫作用。生物拮抗作用。抗衰老。抗癌。條件致病菌條件致病菌引起疾病的條件：寄居部位改變免疫功能降低微生態(tài)失調(diào)及菌群失調(diào)微生態(tài)失調(diào)：正常菌群之間、正常菌群與宿主之間的微生態(tài)平衡被打破。原因：不適當(dāng)?shù)目咕委煛⒒颊呙庖吖δ艿汀⑨t(yī)療措施影響及外來菌入侵菌群失調(diào)：宿主某部位正常菌群中各種細菌的比例發(fā)生大幅度改變。菌群失調(diào)癥：嚴重的菌群失調(diào)引起機體產(chǎn)生一系列的臨床癥狀。小結(jié)細菌在人體及環(huán)境中廣泛存在，可能會導(dǎo)致醫(yī)源性感染或影響檢驗結(jié)果，所以要樹立無菌觀念，嚴格無菌操作！感謝觀看THANKYOUFORWATCHING細菌生長繁殖的基本條件THEBASICCONDITIONSFORBACTERIALGROWTHANDREPRODUCTION細菌生長繁殖的基本條件充足的營養(yǎng)物質(zhì)合適的酸堿度適宜的溫度必要的氣體環(huán)境1234一、充足的營養(yǎng)物質(zhì)細菌營養(yǎng)代謝媒介提供細菌生長的各種元素提供細菌生長的各種元素某些