CN116606285B 一種基于三苯胺基和吲哚衍生物的熒光探針及其制備方法和應用 （河南省農業科學院農業質量標準與檢測技術研究所）

Wood,ChristopherJ.等.Red-AbsCationicAcceptorDyesforPhot一種基于三苯胺基和吲哚衍生物的熒光探本發明屬于化學檢測領域，涉及熒光探針，特別是指一種基于三苯胺基和吲哚衍生物的熒光探針及其制備方法和應用。其具有如下結構光探針能夠在兩種不同的激發波長下分別對二體中二氧化硫和粘度成像的能力。探針BDI能夠實現線粒體功能障礙和凋亡過程中對細胞內SO22。3.根據權利要求2所述的基于三苯胺基和吲哚衍生物的熒光探針的制備方法，其特征4.根據權利要求2或3所述的基于三苯胺基和吲哚衍生5.根據權利要求4所述的基于三苯胺基和吲哚衍生物的熒光探針的制備方法，其特征6.根據權利要求5所述的基于三苯胺基和吲哚衍生物的熒光探針的制備方法，其特征7.根據權利要求2、3、5或6中的任一項所8.權利要求1所述的熒光探針在制備二氧化硫和粘度雙識別9.權利要求1所述的熒光探針在特異性識別酒水10.權利要求1所述的熒光探針在非疾病診斷和治療為目的識別二氧化硫和粘度的應3[0002]二氧化硫(SO2)是一種廣泛存在于空氣中的有毒環境污染物，主要由石化燃料燃硫或者粘度的熒光探針被報道，粘度探針主要是基于分子轉子如菁(Cy)、硼二吡咯烷的熒光探針，該探針在檢測粘度和檢測SO2應用中采用的激發波長均為405nm檢測波長范4。。[0013]本申請制備的熒光探針能夠在兩種不同的激發波長下分別對二氧化硫和粘度進探針結構中的雙鍵發生邁克爾加成反應生成新的產物BDI_SO2實現了對二氧化硫的專一性5度誘導線粒體功能障礙期間引發的內源性SO2濃度[0023]1、本申請的熒光探針能夠在兩種不同的激發波長下分別對二氧化硫和粘度進行增大，探針BDI在730nm處的熒光發射強度也不斷增強，且二者關系完美符合Forster_邁克爾加成反應生成新的產物BDI_SO2實現了對二氧化硫的專一性選擇，其識別機理通過[0025]3、本發明提出的一種基于三苯胺基和吲哚衍生物的熒光探針與粘度響應后其發功能障礙和凋亡過程中對細胞內SO2和粘度的可視化成像，可被視為一種快速響應的顯色6[0030]圖4為本發明的熒光探針BDI識別二氧化硫的熒光選擇性曲線圖，激發波長360[0031]圖5為本發明的熒光探針BDI識別二氧化硫的熒光抗干擾性圖，[0040]圖14為本發明的熒光探針BDI在低粘度溶液中不同溫度下熒光圖，激發波長585[0041]圖15為本發明的熒光探針BDI在高粘度溶液中不同溫度下熒光圖，激發波長585[0043]圖17為本發明的熒光探針BDI識別二氧化硫前后的溶液365nm熒光燈下顏色變化[0044]圖18為本發明的熒光探針BDI識別二氧化硫后的機理驗證高分辨質譜圖（負離子[0045]圖19為本發明的熒光探針BDI在生物活細胞中與商業化綠色線粒體染料共定位成[0046]圖20為本發明的熒光探針BDI在生物活細胞中對外源性和內源性二氧化硫及生物7自阿拉丁試劑有限公司和阿達瑪斯試劑有限公司。在熒光探針BDI的結構確證和分析性能[0056]高分辨質譜測定：HR一ESI一MScalcdforC41H34BrN2S+:587.2515,found8[0064]高分辨質譜測定：HR一ESI一MScalcdforC41H34BrN2S+:587.2515,found9[0072]高分辨質譜測定：HR_ESI_MScalcdforC41H34BrN2S+:587.2515,found[0076]熒光探針要能實現對被檢測物種的單一識別，因此需要測試探針BDI對不同活性入Na2SO3_4322CO33_[0078]為了考察探針BDI在復雜環境中響應二氧化硫時的抗干擾能力，用熒光發射光譜測試了其他活性小分子。探針BDI熒光干擾性實驗測試溶液為Tris_CH3CN（10mM,pH=_410當量的nm處熒光發射強度增強幅度較小，這主要是由于在水溶液體系中S2_易與SO32_發生歸中反_針BDI濃度固定為10μM，調整溶液中Na2SO3濃度（0μM探針BDI對二氧化硫的熒光動力學。探針BDI最低檢出限實驗測試溶液為Tris一CH3CN（10Na2SO3[0086]為了考察不同極性對于探針BDI對于粘度識別的影響，采用熒光發射光譜對不同[0088]由于探針BDI分子中具有典型的粘度響應轉子（三苯胺基團因此考察了其粘度具有清除過量ROS以維持細胞氧化還原平衡的功能，并最終導致SO2水平隨粘度增加而增加。在此開展了探針BDI應用于外源性和內源性SO2以及粘度成像實驗（附圖20具體實驗實驗結果表明探針BDI能夠實現線粒體功能障礙和凋亡過程中對細胞內SO2和粘度的可視