第十單元 生物技術與工程（測試卷）解析版

第十單元生物技術與工程

一、單選題

I.油炸臭豆腐，是我國一些地方的風味小吃，制作時需要將豆腐浸入含有乳酸菌、芽

抱桿菌等微生物的鹵汁中發酵。下列說法正確的是（）

A.鹵汁中的乳酸菌和芽胞桿菌不存在競爭關系

B.乳酸菌發酵產生了乳酸和CO?

C.微生物發酵產生了不同的代謝物使得臭豆腐具有特殊的風味

D.腐乳制作原理是毛霉等多種微生物中的蛋白酶將蛋白質和脂肪等物質分解的結果

【答案】C

【分析】腐乳的制作原理：參與豆腐發酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多種，

其中起主要作用的是毛霉，其代謝類型為異養需氧型，適宜溫度為15℃?18C；毛霉

能夠產生蛋白的和脂肪薄，將蛋白質和脂肪分別水解成小分子的肽和氨基酸、甘油和脂

肪酸。

【詳解】A、鹵汁中的乳酸菌和芽泡桿菌存在競爭關系，共同爭奪空間和營養，A錯誤；

B、乳酸菌發酵產生了乳酸，沒有產生CO2,B錯誤；

C、題中顯示，制作時需要將豆腐浸入含乳酸菌、芽兒桿菌等微生物的鹵汁中發酵形成

的，可見，臭豆腐是在多種微生物的協同作用下制作成的，C正確；

D、腐乳制作原理是毛霉等多種微生物中的蛋白酚和脂肪酶能將蛋白質和脂肪等物質分

解成有機小分子的結果,D產物。

故選C。

2.酵母菌可通過細胞呼吸為其生長繁殖提供能量。下列敘述正確的是

A.酵母菌細胞呼吸分解有機物所釋放的能量，大部分儲存在ATP中

B,酵母菌的細胞呼吸可為其細胞內某理有機物的合成提供原料和能量

C.當其他培養條件適宜時，無氧條件比有氧條件更有利于酵母菌的繁殖

D.在釀酒過程中，需嚴格密封以利于酵母菌充分利用有機物中的能量

【答案】B

【分析】1、酵母菌屬于兼性厭氧菌，既能進行有氧呼吸也能進行無氧呼吸。

2、細胞呼吸的實質是分解有機物，釋放能量，其釋放的能量中大部分以熱能的形式散

失，少數儲存在ATP中。

【詳解】A、醉母菌細胞呼吸分解有機物所釋放的能量，大部分以熱能的形式散失，少

部分儲存在ATP中，A錯誤；

B、酵母菌的細胞呼吸過程可以釋放能量，同時細胞呼吸過程中產生了中間代謝產物，

因此可為其細胞內某些有機物的合成提供原料和能量，B正確；

C、當其他培養條件適宜時，酵母菌在有氧呼吸條件下釋放的能量多，合成的ATP多，

有利于酵母菌的大量繁殖，而無氧呼吸條件下釋放的能量較少，合成的ATP少，不利

于酵母菌的繁殖，此時利于酵母菌的發酵產生酒精，C錯誤；

D、在釀酒過程中，前期階段需要酵母菌進行有氧呼吸大量繁殖，后期在無氧條件下發

酵產生酒精?，但是該無氧發酵階段需要定期放氣，因比不能嚴格密封，D錯誤。

故選Bo

3.為制備圓褐固氮菌和巨大芽胞桿菌微生物菌劑，以降解廚余垃圾廢液中淀粉、蛋白

質、脂肪等物質，研究人員探究了圓褐固氮菌和巨大芽花桿菌處理某廚余垃圾廢液的最

佳接種量比，將兩種菌液進行了不同配比的分組處理，如下表所示。下列敘述錯誤的是

()

編號RoRiR2R?Ri

圓褐固氮菌：巨大芽抱桿菌1:()2:11:11:20:l

A.微生物利用其合成分泌的淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等分解廢液中的相關物質

B.實驗過程中需將上述菌液分別接種于相同體積的廚余垃圾廢液中進行培養

C.可通過檢測實驗前后淀粉、蛋白質、脂肪的含量，確定適宜的配比

D.表中編號Ri、R?、R3組構成相互對照，編號Ro、R4組為空白對照

【答案】D

【分析】本實驗的目的為了探究圓褐固氮菌和巨大芽兒桿菌處理某廚余垃圾廢液的最佳

接種量比，自變量是兩種菌的接種比，因變量是房余垃圾廢液中淀粉、蛋白質、脂肪等

物質的剩余量。

【詳解】A、酶具有專一性，可分解相應的物質，微生物利用其合成分泌的淀粉酶、蛋

白酶、脂肪酶等分解廢液中的相關物質，A正確；

B、實驗過程中，廚余垃圾廢液的作用類似于培養基，其體積是無關變量，應該保持相

同，B正確；

C、可通過檢測實驗前后廢液中淀粉、蛋白質、脂肪的含量，以確定適宜的配比，含量

最少的比例最適宜，C衛確；

D、表中實驗均為實驗組相互形成對比實驗，空白實驗為接種等量無菌水，D錯誤。

故選D。

4.為了處理污水中的有害的、難以降解的有機化合物A,研究團隊用化合物A、磷酸

鹽、鎂鹽和微量元素等配制了培養基，成功篩選出能高效降解化合物A的細菌。實驗

的主要步驟如下圖所示，相關敘述錯誤的是（）

污水池中震蕩培養若干天后，挎種

將施樣器測定各瓶中化合物A的含量/巧因休

接種培養基

候選菌

重復多次，直至獲得目的菌

A.實驗涉及的培養基使用前必須經過濕熱滅菌

B.初選培養基應該以化合物A作為唯一碳源

C.應選擇錐形瓶中化合物A含量低的菌種擴大培養

D.實驗篩選獲得的化合物A高效降解菌就直接用于污水處理

【答案】D

【分析】分析題干信息.該實驗的目的是篩選出高效降解化合物A的細菌，在以化合

物A的培養基中只有能降解化合物A的微生物才能生長繁殖，不能利用化合物A的微

生物因缺乏碳源等，無法生長繁殖。

【詳解】A、培養微生物的培養基需要進行高溫高壓滅南，即使用前必須經過濕熱滅菌，

A正確：

B、要篩選出能高效降解化合物A的細菌，因此培養基應以化合物A作為唯一碳源，

則不能分解化合物A的微生物由于缺乏碳源不能在選擇培養基上生長，B正確：

C、錐形瓶中化合物A含量越低，說明該菌種分解化合物A的能力越強，因此應選擇

錐形瓶中化合物A含量低的菌種擴大培養，C正確；

D、實篩選出來的菌株還需要在具體的環境中進一步測試，才能用于污水處理，D錯誤；

故選Do

5.花椰菜（2n=18）對黑腐病無抗性，黑芥（2n=16）對黑腐病具有一定的抗性。利

用植物體細胞雜交技術培育抗黑腐病的雜種植株，如圖1。通過蛋白質電泳技術分析了

親本（I、H）及待測植株（1-5）中某些特異性蛋白，結果如圖2所示。下列有關敘

述錯送的是（）

圖1圖2

A.過程①取花椰菜的頂芽細胞進行體細胞雜交有利于獲得脫毒苗

B.過程②是誘導原生質體融合，休現了細胞膜的流動性

C.圖2中4和5是雜種植株，其體細胞的染色體數均為17條

D.篩選抗病性強的雜種植株可用病菌懸浮液均勻噴施于植株葉片，觀測其發病情況

【答案】C

【分析】1、植物體細胞雜交技術：就是將不同種的植物體細胞原生質體在一定條件下

融合成雜種細胞，并把雜種細胞培育成完整植物體的技術。植物體細胞雜交的終點是培

育成雜種植株，而不是形成雜種細胞就結束；雜種植株的特征：具備兩種植物的遺傳特

征，原因是雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質；植物體細胞雜交克服了遠緣雜交不親

和的障礙。

2、根據圖譜分析，4號和5號個體含有黑芥和花椰菜兩種類型的蛋白質，說明是雜種

細胞，而I、2、3號個體只有某一親本的蛋白質，說明不是雜種細胞。

【詳解】A、植物頂端分生區附近的病毒極少，甚至無病毒。因此取花椰菜的頂芽細胞

進行體細胞雜交有利于獲得脫毒苗，A正確；

B、過程②為原生質體融合過程，需用物理或者化學（PEG等）的方法處理，體現了細胞

膜的流動性，B正確；

C、根據圖2分析4號和5號個體含有兩種類型的蛋白質，說明是雜種細胞，雜種植株

中含有兩種植物的遺傳物質，故其體細胞的染色體數為34條，C錯誤；

D、可將病菌懸浮液均勻噴施于植株葉片上，觀測其發病情況，篩選出抗病性強的雜種

植株，D正確。

故選C。

6.科研人員利用野生型清水紫花苜蓿和里奧百脈根為材料培育抗鼓脹病的新型牧草，

研究主要流程如下圖。下列說法錯誤的是（）

注：IOA可抑制植物細抱呼吸第一階段，R-6G可阻止線粒體的功能

A.將兩種細胞分別置于較高滲透壓環境下，有利于去除細胞壁獲得兩種植物的原生

質體

B.異源融合體因代謝互補可恢復生長并獲得再生能力

C.③過程誘導生芽的培養基中BA（細胞分裂素類似物）與NAA的濃度比值低于

②過程

D.圖示技術可克服遠緣雜交不親和的障礙

【答案】C

【分析】題圖分析：圖示為植物體細胞雜交獲得雜種植株的過程，圖中①表示原生質體

融合形成雜種細胞以及雜種細胞的增殖，②表示脫分化過程，③表示再分化過程。

【詳解】A、將兩種細胞分別置于較高滲透壓環境下，有利于去除細胞壁獲得兩種植物

的原生質體，避免原生質體在酷解過程中受到損傷，同時也不至于導致原生質體吸水漲

破，A正確；

B、結合圖示信息可推測，異源融合體因代謝互補可恢復生長并獲得再生能力，B正確；

C、③過程為再分化過程，誘導生芽的培養基中BA（細胞分裂素類似物）與NAA的濃

度比值高于②過程，這樣有利于誘導生芽，C錯誤；

D、圖示技術為植物體細胞雜交技術，該技術的優勢在于克服遠緣雜交不親和的障得，

D正確。

故選C。

7.在花椰菜種植過程中發現，花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，而野生的黑芥

則具有抗黑腐病的特性。科研人員利用植物體細胞雜交技術培育具有抗病性狀的花椰菜

新品種如圖，培育過程中通過紫外線照射使黑芥部分柒色體結構被破壞。下列敘述正確

的是（）

戶紫外線

光照培養的抗病葉肉細胞

型黑芥菌的幼葉K原生質體〕

（PFG

根細胞'培養、篩選

暗培養的易感型I?

花椰菜的幼根原生質體

A.過程①將兩種細胞放入纖維素酶和果膠酶溶液中處理?段時間，制備出完整原生

質休

B.過程②顯微鏡下觀察到兩個原生質體細胞核融合為一個細胞核，證明已形成雜種

細胞

C.過程③獲得的愈傷組織細胞在顯微鏡下無法觀察到來臼于黑芥苗葉肉細胞的葉綠

體

D.完成鑒定后，最終獲得的雜種抗病植株中具有完整的花椰菜和黑芥的遺傳信息

【答案】C

【分析】分析題圖：圖示為采用植物體細胞雜交技術獲得抗黑腐病雜種植株的流程圖，

其中①表示采用酶解法（纖維素能和果膠酹）去除細胞壁的過程；②表示誘導原生質體

砸合的過程；③表示脫分化過程。

【詳解】A、①過程將兩種細胞置于等滲溶液中，用纖維素酶和果膠酶處理以除去細胞

壁，獲得有活力的原生質體，A錯誤；

B、過程②融合的原生質體再生形成新的細胞壁，證明已形成雜種細胞，B錯誤；

c、愈傷組織不含葉綠體，因此過程③獲得的愈傷組織細胞在顯微鏡卜.無法觀察到來自

于黑芥苗葉肉細胞的葉綠體，C正確；

D、由「紫外線照射使黑芥部分染色體結構被破壞，因此完成鑒定后，最終獲得的雜種

抗病植株中不具有完整的黑芥的遺傳信息，D錯誤。

故選C。

8.為解決雜交瘤細胞在傳代培養中出現來自B淋巴細胞的染色體丟失問題，研究者將

抗原刺激后的B淋巴細胞，用EBV（一種病毒顆粒）感染，獲得“染色體核型穩定”的

EBV轉化細胞。EBV轉化細胞能夠在HAT培養基中存活，但對Oua敏感。骨髓瘤細胞

在HAT培養基中不能存活，但對Oua不敏感。下圖表示操作過程。下列分析錯誤的是

（）

骨髓瘤細胞PEGS蛤、雜交

抗原則曳動物一?B淋巴細胞至；EBV^^化細胞HATi音養基'癖細胞

+Oua篩選

A.B淋巴細胞可從多次間歇注射某種抗原的動物脾臟中獲得

B.HAT培養基和Oua篩選去除的是未融合的EBV轉化細胞

C.雜交瘤細胞染色體丟失可能會導致抗體的產生能力下降

D.圖中獲得的雜交瘤細胞需經克隆化培養和抗體檢測篩選后才可用于生產

【答案】B

【分析】1、單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原，從該動物的脾臟中獲取效

應B細胞，將效應B細胞與骨髓瘤細胞融合，篩選出能產生單一抗體的雜交瘤細胞，

克隆化培養雜交瘤細胞（體內培養和體外培養），最后獲取單克隆抗體。

2、兩次篩選：篩選得到雜交瘤細胞（去掉未雜交的細胞以及自身融合的細胞）；篩選出

能夠產生特異性抗體的細胞群。

【詳解】A、對動物進行間歇注射抗原處理，以刺激動物機體產生相應的B淋巴細胞;

B淋巴細胞在骨髓中發育成熟，可分布于淋巴結和脾臟等處，故B淋巴細胞可從多次間

歇注射某種抗原的動物脾臟中獲得，A正確；

B、據題意“EBV轉化細胞能夠在HAT培養基中存活，但對Oua敏感；骨髓瘤細胞在

HAT培養基中不能存活，但對Oua不敏感”可知，HAT培養基去除的是未與EBV轉化

細胞融合的骨髓瘤細胞和自身融合的骨髓瘤細胞，Oua篩選去除的是未與骨髓瘤細胞融

合的EBV轉化細胞和自身融合的EBV轉化細胞，B錯誤；

C、抗體是由漿細胞分泌的，雜交瘤細胞若丟失來自B淋巴細胞的染色體，可能會導致

抗體產生能力下降，C正確；

D、圖示獲得的雜交瘤細胞還需要經過進一步的篩選，需經克隆化培養化，并用專一抗

體檢測呈現陽性的雜交瘤細胞才能直接用于生產單克隆抗體，D正確。

故選B。

9.近日，有關新冠“二陽”的話題頻上熱搜，很多市民再次陷入恐慌，并采用抗原試劑

盒進行新冠病毒的自我檢測。試劑盒中的一種單克隆抗體能與新冠病毒表面的S蛋白特

異性結合，發揮診斷作用，該單克隆抗體可通過向6?8周齡的Balb/c小鼠注射重組蛋

白后經培養、篩選而獲得.下列敘述錯誤的是（）

A.制備單克隆抗體使用的B淋巴細胞取自經過多次抗原注射的Balb/c小鼠的脾臟

B.用96孔板培養雜交瘤細胞時，接種的每一個雜交瘤細胞均能產生所需抗體

C.雜交瘤細胞可放入CO?培養箱中進行培養，在培養過程中一般無接觸抑制現象

D.將抗體檢測呈陽性的雜交瘤細胞在體外條件下大規模培養，可獲取大量的抗S

蛋白的單克隆抗體

【答案】B

【分析】將抗原注射入小鼠中，獲得免疫小鼠，從小鼠脾臟中獲得B淋巴細胞，將B

淋巴細胞和骨髓瘤細胞通過PEG融合成雜交瘤細胞,再用特定的選擇培養基培養篩選，

最終獲得能在體外大量繁殖的同時能產生特異性抗體的細胞。

【詳解】A、注射過S蛋白的小鼠脾臟中有能產生特定抗體的B淋巴細胞，且多次注射

抗原激活多次免疫效應.產生更多免疫細胞，A正確；

B、由于雜交瘤細胞培養初期不穩定，可能丟失部分染色體或出現變異的情況，導致不

能產生抗體，或由于B細胞種類差異導致產生的抗體不同，B錯誤；

C、雜交瘤細胞具有骨髓瘤細胞的特征，細胞表面缺少黏性蛋白，培養過程中一般無接

觸抑制現象，C正確；

D、將抗體檢測呈陽性的雜交瘤細胞在體外條件下大規模培養，可以獲取大量的抗S蛋

白的單克隆抗體，D正確。

故選B。

10.單克隆抗體在多種疾病的診斷和治療中發揮重要作用，下圖是利用小鼠制備單克隆

抗體的過程，以下敘述錯誤的是（）

x.?細胞融合］?篩選細胞M?

己免疫的B淋巴細疝》?6。0辭oo］一be—ego。4

oooz/:隆化4養：|

（

°ocP舄寸昌rl修01修~1得~1修

骨醐瘤細胞

抗體陽性檢測獲得所需細胞

A.已免疫的小鼠脾臟中，每個脾B淋巴細胞可產生多種抗體，所以需要進行細胞

篩選

B.可在無菌條件下采用電融合法誘導細胞融合

C.在特定培養基中篩選出的細胞M為雜交瘤細胞

D.經過上圖細胞篩選過程之后的細胞還需進行進一步篩選

【答案】A

【分析［單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內，使其發生免疫，小鼠

體內產生具有免疫能力的B淋巴細胞。利用動物細胞融合技術將B淋巴細胞和骨髓瘤

細胞融合，在經過兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細胞1去掉未雜交的細胞以及自身融合

的細胞）②篩選出能夠七生特異性抗體的細胞群。兩次抗體檢測：專一抗體檢驗陽性,

獲得能產生特異性抗體、乂能大量增殖雜交瘤細胞。最后從培養液或小鼠腹水中提取單

克隆抗體。

【詳解】A、一般而言，一種B淋巴細胞只能產生一種抗體，A錯誤；

B、誘導動物細胞融合的方法有：電融合法、聚乙二醺、滅活的病毒，因此可在無筐條

件下采用電融合法誘導細胞融合，B正確；

C、利用動物細胞融合技術將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合，在特定培養基中篩選出的

細胞M為雜交瘤細胞，C正確：

D、經過上圖細胞篩選過程之后的細胞還需進行進?步篩選，即進行專?抗體陽性檢測：

根據抗原一抗體特異性結合原理，檢測時取培養液滴加相應抗原出現反應為目標細庖,

D正確。

故選A。

11.一對姐弟被確認為全球第二對半同卵雙胞胎，該對半同卵雙胞胎的受精及胚胎發育

過程如圖所示。一般情況下圖2受精卵無法發育，但該受精卵能有絲分裂如圖3,染色

單體分離后分別移向細胞的三個不同方向，從而分裂成三個細胞如圖4,其中兩個細胞

發育成姐弟二人。下列說法正確的是（）

圖1圖2醫3圖4

A.圖1表示該異常胚胎的受精過程，此時的卵子為初級卵母細胞

B.該卵子與2個精子受精，表明透明帶和卵細胞膜在阻止多精入卵的過程中不起

作用

C.這對姐弟來源于母親的染色體一般相同，來源于父親的染色體不同

D.若圖4細胞A包含父系和母系染色體組各1個，則細胞C含2個母系染色體組

【答案】C

【分析】受精作用是卵細胞和精子相互識別、融合成為受精卵的過程。受精卵的染色體，

有一半來自精子，另一半來自卵細胞，受精卵的細胞質DNA全部來自于卵細胞。

【詳解】A、圖1表示該異常胚胎的受精過程，有2個精子的頭部進入了卵細胞，此時

的卵子為減數第二次分裂中期的次級卵母細胞，A錯誤：

B、該卵子與2個精子受精，是異常受精，不能說明透明帶和卵細胞膜在阻止多精入卵

的過程中不起作用，B錯誤；

C、圖4中A、C的染色體都是來自于精子的父系染色體組1個和卵細胞的母系染色體

組1個，而B的染色體來自于兩個精子（兩個染色體組都是來自父系），這對姐弟來源

于母親的染色體一般相同（來自雌原核），來源于父親的染色體不同（分別來自兩個不

同的雄原核），C正確；

D、圖4中A、C的染色體來自于精子和卵細胞，若圖4細胞A包含父系和母系染色體

組各1個，則細胞C包含父系和母系染色體組各1個，D錯誤。

故選Co

12.EPO是人體腎臟分泌的?種肽類激素，能使骨髓生成紅細胞的量增加，提高血紅蛋

白含量，增加血液攜氧'供氧能力，是臨床上一種治療腎性貧血的藥物。卜圖是采用中

國倉鼠卵巢細胞表達系統來生產EPO的過程。下列相關敘述錯誤的是（）

A.在③過程，精子需要依次穿越卵母細胞的透明帶和卵細胞膜

B.在⑥之前，需要割取囊胚的部分滋養層細胞做DNA分析，鑒定性別

C.胚胎移植時進行同期發情處理，目的是降低代孕倉鼠對移入胚胎的免疫排斥反

應

D.甲乙丙丁是同一物種，但只有丁獲得了人類的EPO基因

【答案】C

【分析】圖中①表示卵母細胞的采集和培養，②為精了的采集和獲能，③為體外受精，

④為目的基因導入受體細胞，⑤為胚胎的早期培喬，⑥為胚胎移植，⑦為轉EPO基因

倉鼠的生長發育過程，⑧為檢測目的基因EPO是否表達出EPO活性成分。

【詳解】A、③為體外受精，受精時，精子需要依次穿越卵母細胞的透明帶和卵細胞膜，

A正確；

B、根據題意“采用中國倉鼠卵巢細胞表達系統來生產EPO的過程”，⑥為胚胎移植，在

此之前需要割取囊胚的部分滋養層細胞做DNA分析，鑒定性別，B正確；

C、胚胎移植時進行同期發情處理，是為胚胎移入受體提供相同的生理環境，此時代孕

倉鼠對外來胚胎基本不存在免疫排斥，C錯誤；

D、由圖示可知，甲乙丙J.仍是同一物種，但只有丁通過轉基因技術獲得了人類的EPO

基因，D正確。

故選C。

13.CRISPR心as9是一種基因編輯技術，Cas9蛋白能與人工設計的sgRNA形成復合體

（如圖）.利用該技術可以對DNA進行一系列的定向改造。下列相關敘述錯誤的是（）

目的基因

.......................................

\.iwwtii、7一Cas9蛋白

\^^-$8RNA

切斷*

IIIIIHIHIIIlIHHIlllllI

修復（

iwiiiiiiiiiiifinnr

A.Cas9蛋白屬于限制酶，能切割目的基因

B.sgRNA具有能與目的基因發生堿基互補配對的結構

C.基因編輯技術能夠定點插入、刪除或替換部分堿基而

D.通過基因編輯技術引起的變異屬于基因重組

【答案】D

【分析】CRISPR/Cas9系統基因編輯技術是利用該基因表達系統中的引導RNA能識別

并結合特定的DNA序列，從而引導Cas9蛋白結合到相應位置并剪切DNA,最終實現

對靶基因序列的編輯。

【詳解】AB、Cas9蛋白能與人工設計的sgRNA形成更合體，復合體中的sgRNA與目

的基因按照堿基互補配對原則特異性結合，Cas9蛋白相當于限制的，Cas9蛋白結合到

相應位置并剪切DNA,最終實現對靶基因序列的編輯，AB正確；

C、復合體在sgRNA引導下結合目的基因，Cas9蛋白切割目的基因造成雙鏈斷裂，細

胞在修復斷裂的DNA時會隨機插入、刪除或替換部分堿基對，C正確；

D、通過基因編輯技術引起的變異屬于基因突變，D錯誤。

故選D。

14.《詩經》中有“投我以木瓜，報之以瓊瑤”的詩句。番木瓜易感染番木瓜環斑病毒（英

文縮寫為PRSV）而獲病。我國華南農業大學的科研人員利用農桿菌轉化法，成功培育

出轉基因番木瓜“華農一號”，大致流程如圖所示。下列分析錯誤的是（）

④

番木瓜愈傷組織

轉基因番

木瓜植株

A.過程①稱為逆轉錄，此過程中用到的酶有逆轉錄酶等

B.過程②用限制酶BamHI在Ti質粒切開?個切口暴露出兩個游離的磷酸基團

C.過程③將重組質粒轉入農桿菌之前，需先用Ca2+載體處理農桿菌

D.過程⑤產生的木瓜植株即使有抗PRSV基因也不一定具有抗PRSV的性狀

【答案】C

【分析】分析題圖：圖中①為逆轉錄過程，②為基因表達載體的構建過程，③④是采用

農桿菌轉化法將目的基因導入受體細胞，⑤是再分化過程。

【詳解】A、過程①是以RNA為模板合成DNA的過程，為逆轉錄，需要逆轉錄酹，A

正確；

B、質粒為環狀DNA分子，用限制酶BatnHI在Ti質粒切開一個切口將暴露出兩個游

離的磷酸基團，B正確；

C、過程③將重組質粒轉入農桿菌之前，需先用Ca2+（不是Ca2+載體）處理農桿菌，

使其容易吸收周圍的DNA分子，C錯誤；

D、由于導入的目的基因不一定表達，因此過程⑤產生的木瓜植株即使有抗PRSV基因

也不一定具有抗PRSV的性狀，D正確。

故選C。

15.現代生物技術發展迅猛，改變著人類的生產和生活方式，成為促進社會和經濟發展

的重要力量。生物技術在給人帶來福音和便利的同時，對人類社會的安全性也產生了一

定的影響。下列有關說法正確的是（）

A.轉基因技術是提高生物多樣性的一種重要手段

B.轉基因抗蟲植株可以減少農藥的使用，因此對環境不會造成任何影響

C.克隆技術如果被不當利用將給社會造成災難，應禁止任何克隆研究

D.轉基因農作物對于解決糧食、能源等問題具有積極作用，但也存在一定風險

【答案】D

【分析】轉基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應、過敏源、營養成分改變）、

生物安全（對生物多樣性的影響）、環境安全（對生態系統穩定性的影響）。

【詳解】A、生物多樣性包括基因多樣性、物種多樣性和生態系統多樣性，轉基因技術

實現了不同物種間基因的轉移，但并未提高生物多樣性，A錯誤；

B、種植轉基因抗蟲作物，可以減少農藥的使用量，但可能會環境造成基因污染等，B

錯誤；

C、克隆技術如果被不當利用將給社會造成災難，應禁止生殖性克隆，但是不反對治療

性克隆，如治療性克隆可用于治療白血病等，C錯誤；

D、轉基因農作物對于解次糧食、能源等問題起了枳極作用，同時也存在著一定風險，

如可能有滯后效應、出現過敏源、食物的營養成分改變等，D正確。

故選D。

二、多選題

16.尿素是?種高濃度氮肥，被土壤中某些細菌分解為氨后，再轉化成鉉鹽、硝酸鹽等

可以被植物吸收利用。某同學要分離土壤中能分解尿素的細菌，并統計每克土壤樣品中

的活菌數目，培養基配方如下表所示。下列有關敘述正確的是()

葡萄糖尿素

成分KH2PO4Na2HPO4MgSO4-7H2O瓊脂

含量1.4g2.1g0.2g10.0g1.0g15.0g

A.有些細菌能分解尿素的根本原因是其能合成版酶

B.若培養基要調節pH,應該在滅菌之前進行

C.KH2PO4和Na2HPO4可維持培養基pH的相對穩定

D.用稀釋涂布平板法統計的菌落數往往比實際的活菌數目少

【答案】BCD

【分析】1、培養基選擇分解尿素的微生物的原理：培養基以尿素為唯一的氮源，只有

能合成.腺酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源。缺乏服酶的微生物由于不能分解

尿素，缺乏氮源而不能生長發育繁殖，而受到抑制，所以用此培養基就能夠選擇出分解

尿素的微生物。

2、微生物常見的接種的方法

①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培

養。在劃線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最

后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養

后可形成單個菌落。

【詳解】A、某些細菌能分解尿素的原因是能合成并分泌胭酶，根本原因是具有胭醛基

因，A錯誤；

B、培養基制作完成后需要先調整pH,后進行滅菌，B正確；

C、KH2P04和Na2Hp()4屬于緩沖液，可維持培養基pH的相對穩定，C正確；

D、由于兩個或多個細菌可能形成一個菌落，所以用稀釋涂布平板法統計的菌落數往往

比實際的活菌數目少，D正確。

故選BCDo

17.如圖為腎臟上皮細胞培養過程示意圖，下列敘述正確的是（）

A.甲—乙過程需要用胰蛋白的或膠原蛋白的處理

B.內過程指細胞在添加血清的合成培養基中原代培養

C.丙和丁過程均會出現細胞貼壁和接觸抑制現象

D.丁過程是傳代培養的細胞，細胞都能進行無限增殖

【答案】ABC

【分析】1、動物細胞培養過程：取動物組織塊T剪碎組織T用胰蛋白酶處理分散成單

個細胞一制成細胞懸液T轉入培養液中（原代培養）一放入二氧化碳培養箱培養一貼滿

瓶壁的細胞用能分散為單個細胞，制成細胞懸液一轉入培養液（傳代培養）一放入二氧

化碳培養箱培養。

2、圖示為腎臟上皮細胞培養過程示意圖，圖中甲表示剪碎腎臟組織塊，乙表示制成細

胞懸液，丙表示原代培養，丁表示傳代培養。

【詳解】A、甲剪碎腎臟組織塊T乙制成細胞懸液過程需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處

理，分散成單個細胞，A正確；

B、丙過程指細胞在添加血清的合成培養基中原代培養，B正確；

C、內原代培養過程和丁傳代培養過程均會出現細胞貼壁和接觸抑制現象，C正確；

D、丁過程是傳代培養過程，該過程少部分細胞遺傳物質可能發生了變化，進而無限繁

殖，D錯誤。

故選ABCo

【點睛】本題考查動物細胞培養的相關知識，要求考生識記動物細胞培養的具體過程,

掌握原代培養和傳代培養的區別：識記動物細胞培養的條件?.能結合所學的知識準確判

斷各選項，難度不大。

18.哺乳動物卵原細胞減數分裂形成成熟卯子的過程，只有在促性腺激素和精子的誘導

下才能完成。下面為某哺乳動物卵子及早期胚胎的形成過程示意圖（N表示染色體組）。

據圖分析，下列敘述正確的是（）

A.次級卵母細胞形成的過程需要激素調節

B.細胞IH只有在精子的作用下才能形成成熟卵子

C.II.III和IV細胞分裂后期染色體數目相同

D.培育轉基因動物應選擇細胞IV作為受體細胞

【答案】ABD

【分析】分析題圖：圖示為某哺乳動物卵子及早期胚胎的形成過程示意圖，其中【為卵

原細胞；II為初級卵母細胞；川次級卵母細胞；IV為受精卵。

【詳解】A、由題意可知刺激卵母細胞的形成需要促性腺激素的參與，A正確；

B、細胞IH次級卵母細胞在精子的作用下才能形成成熟的卵細胞，B正確；

C、H初級卵母細胞減數第一次分裂后期染色體數是2n,IV受精卵細胞有絲分裂后期染

色體數目是4n,IH次級卵母細胞減數第二次分裂后期染色體數是2n,C錯誤；

D、培育轉基因動物最好選擇受精卵作為受體細胞，D正確。

故選ABD.

19.OsGLOl>EcCAT、EcGCL和TSR四個基因分別編碼四種不同的酶，研究人員將

這些基因分別與葉綠體轉運肽（引導合成的蛋白質進入葉綠體）基因連接，構建多基因

表達載體（載體中部分序列如下圖所示），利用農桿的轉化法轉化水稻，在水稻葉綠體

內構建了一條新代謝途徑，提高了水稻的產量。下列敘述錯誤的是（）

紛ESGCI>TSR/||K那用素抗性基因卜

I潮揖索抗性塞網?物國SS91

T-DNA

注：*后動/n終止了物葉綠體轉運肽

A.四個基因轉錄時都以DNA的同一條單鏈為模板

B.四個基因都在水稻葉綠體內進行轉錄翻譯

C.應選用含卡那霉素的培養基篩選被農桿菌轉化的水稻細胞

D.可用抗原-抗體雜交技術檢測四種能在轉基因水稻中的表達情況

【答案】ABC

【分析】線粒體和葉綠體的DNA,都能夠進行半自主自我復制，并通過轉錄和翻譯控

制某此蛋白質的合成，汩.同時受到細胞核基因的控制c

標記基因：便于重組DNA分子的篩選。

【詳解】A、四個基因轉錄時不?定都以DNA的同一條單鏈為模板，A錯誤；

B、這些基因在葉綠體外合成，由葉綠體轉運肽引導合成的蛋白質進入葉綠體，B錯誤；

C卡那霉素不在T-DNA上，應用潮霉素培養基篩選被農桿菌轉化的水稻細胞,C錯誤；

D、可用抗原-抗體雜交技術檢測是否有相應的蛋白質產生，從而檢測四種酶在轉基因水

稻中的表達情況，D正確。

故選ABCo

20.SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康復后的血清中有抗S

蛋白的特異性抗體。研制預防SARS病毒的疫苗簡要的操作流程如下，有關敘述正確的

是

A.步驟①所代表的反應過程是逆轉錄

B.將大量擴增的S基因直接導入大腸桿菌，也能得到表達的S蛋白

C.步驟③和⑤常用的方法分別是農桿菌轉化法和顯微注射法

D.可用抗原一抗體雜交法檢測細胞中是否真正成功表達了病毒S蛋白

【答案】AD

【分析】分析題圖：圖示表示研制預防SARS病毒的沒苗簡要的操作流程，其中①是以

RNA為模板合成DNA的逆轉錄過程，②表示基因表達載體的構建過程，③表示將目的

基因導入大腸桿菌細胞.④表示目的基因在原核細胞中的表達；⑤表示將目的基因導入

動物細胞，⑥表示目的基因在真核細胞中的表達。

【詳解】A、步驟①所代表的反應過程是以RNA為模板合成DNA的逆轉錄，A正魂；

B、目的基因需要與運載體連接后才能導入受體細胞，不能直接導入受體細胞，B錯誤；

C、將目的基因導入微生物細胞常用Ca2+處理法，將目的基因導入動物細胞最有效的方

法是顯微注射法，即步驟③和⑤常用的方法分別是Ca2+處理法和顯微注射法，C錯誤；

D、可用抗原-抗體雜交法檢測FI的基因是否成功表達，即可用抗原一抗體雜交法檢測細

胞中是否真正成功表達了病毒S蛋白，D正確。

故選AD.

【點睛】本題結合圖解，考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理、操

作步驟等，掌握各操作步驟中需要注意的細節，能正確分析題圖，再結合所學的知識準

確判斷各選項。

三、綜合題

21.人誤食被金黃色葡荀球菌污染的食物后，可能出現原瀉、嘔吐等癥狀。研究者嘗試

用蜻蜓腸道共生菌的代謝產物開發新型抑菌藥物，部分實驗步驟如圖所示，圖中數字編

號代表實驗步驟。

4QmL4.5mL4.5mL

無菌水無菌水無菌水

⑴⑤步驟培養腸道共生菌的培養基配方如下表所示:

藥品馬鈴薯葡萄糖X水

用量200.0g20.0g20.0g1000mL

①表格中的藥品X最可能是一；

②表格中的馬鈴薯可以提供的營養成分有一。

(2)⑤步驟中，稀釋涂布了5個培養基，每個培養基上涂布0.1mL稀釋液，5個培養基.上

生長的菌落數分別為8、62、75、88、95,則在③步驟的蜻蜓腸道提取液中，腸道共生

菌的密度為一個/mL(假設所有共生菌都能在培養基上生長)。

(3)為了保證實驗的順利進行，下列操作正確的有一。

①研磨蜻蜓腸道時加入蒸儲水，且在無菌操作臺進行

②解剖靖蜓川的鏡子等工具，事先用干熱滅菌法進行滅菌

③進行稀釋涂布操作時，將需要用到的接種環先進行灼燒滅菌

④實驗結束后，將實驗產生的廢棄物進行集中滅菌處理

(4)接種培養一段時間，培養基上共出現42種蜻蜓腸道共生菌，通過提取其DNA并測

序可從分子水平上將其進行區分，其原理是一。

浸過B港的圓紙片

.

H霜,-霜露

菌水的圓制片

(5)研究者分離出蜻蜓腸道菌株A,提取其代謝產物并用丙酮定容制成“藥液A”。欲比較

“藥液A”與慶大霉素液(用無菌水配制的抗生素溶液)對金黃色葡萄球菌的抑菌效果，

請在表格中填寫簡要的實驗步驟，完成實驗方案(所有實驗均在無菌環境操作)。

步驟與R操作與要點

的

接種微生

在培養基上均勻涂布①—

物

用無菌鏡子將分別浸過A、B、C液和無菌水的圓紙片瀝干后均勻置「上述

加入藥物

培養基表面。A、B、C液分別為“藥液A”、②—、③—

培養微生

將培養基在④一℃下培養24小時

物

觀測并分

測量⑤一.記錄、比較、得出結論

析結果

【答案】（1）瓊脂碳源、氮源、無機鹽（、生長因子）

（2）8x105

⑶②④

（4）DNA分子具有特異性

（5）（稀釋的）金黃色葡萄球菌菌液丙酮慶大霉素液37恨紙

片周圍無菌落生長區域（透明圈、清晰區）的大小（直徑）

【分析】培養基的概念及營養構成

（1）概念：人們按照微生物對營養物質的不同需求，配制出的供其生長繁殖的營養基

質；

（2）營養構成：各種培養基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生

物生長對pH、特殊營養物質以及氧氣的要求.例如，培養乳酸桿菌時需要在培養基中

添加維生素，培養霉菌時需將培養基的pH調至酸性，培養細菌時需將pH調至中性或

微堿性，培養厭氧微生物時則需要提供無氧的條件。

【詳解】（1）①⑤步驟中的培養基為固體培養基，因比表格中的藥品X應該為瓊脂。

②表格中的馬鈴薯含有豐富的有機物，因而可以提供培養基中的碳源、氮源、無機鹽和

生長因子等成分。

（2）⑤步驟中，稀釋涂布了5個培養基，每個培養基上涂布0.1mL稀釋液，5個培養

基上生長的菌落數分別為8、62、75、88、95,圖中共稀釋了3次，因此最后的稀釋倍

數為103,在計數時通常計數菌落數在30~300之間的平板，因此，③步驟的蜻蜓腸道

提取液中，腸道共生菌的密度為（62+75+88+95）+4:0.1x103=8x105個/mL（假設所有

共生菌都能在培養基上生長）。

（3）①為避免雜菌污染，研磨靖蜓腸道時加入無菌水，且在無菌操作臺進行，①錯誤；

②解剖蜻蜓用的銀子等工具需要滅菌處理，通常用干熱滅菌法進行滅菌，②正確；

③進行稀釋涂布操作時.將需要用到的涂布器進行灼燒滅菌，③錯誤；

④實驗結束后，將實驗產生的廢棄物進行集中滅菌處理，避免污染環境和操作者，④正

確。

故選②?。

（4）接種培養一段時間，培養基上共出現42種蜻蜓揚道共生菌，通過提取其DNA并

測序可從分子水平上將其進行區分，這是根據DNA分子的特異性來鑒別的，即每種生

物的DNA分子具有其特定的堿基序列。

（5）本實驗的目的是比較“藥液A”與慶大霉素液（用無菌水配制的抗生素溶液）對金

黃色葡萄球菌的抑菌效果，因而本實驗的自變量是培養基中加入的藥物種類，因變量是

抑菌圈的大小。因此實驗步驟為：首先培養出金黃色葡萄球菌的菌落，因此步驟一種操

作為在培養基上均勻涂布（稀糅的）金黃色葡萄球菌菌液，以便獲得均勻生長的金黃色

葡萄球菌的菌落。而后用無菌鐐子將分別浸過A、B、C液和無菌水的圓紙片瀝干后均

勻置于上述培養基表面。A、B、C液分別為“藥液A”、丙酮、慶大霉素液。將培養基在

37c下培養24小時，該溫度是細菌生長的適宜溫度，最后測量圓紙片周圍無菌落生長

區域，記錄、比較、得出結論，該區域越大說明抑菌效果越好。

22.將基因型為AaBb的水稻（具有24條染色體）的葉肉細胞通過無菌操作接入含有

營養成分全面的培養基的試管中，在一定條件下培養形成試管幼苗，其過程如圖所示:

水稻的某種細胞曲愈傷組織丹向~阿

（1）圖中水稻的葉肉細胞要經過消毒處理后才能進行培養。其中［1］過程中，細胞的分

化程度會填"升高'"降低''或“不變”）。愈傷組織經過［2］過程重新分化成根和芽的

過程叫o常用的培養基有脫分化培養基、生根培養基和生芽培養基，這三

種培養基的主要差異是o

（2）在形成愈傷組織的過程中，細胞必須不斷地從培養基中獲得和小分子有

機物等營養物質。

⑶如果［4］是脫毒植株，則“水稻的某種細胞”應選用_______________細胞，這種繁殖

方式實際上是,培養成的植株的基因型為。

（4）如果“某種細胞”選用的是花粉細胞，則［4］稱為植株，該植株的特

點是，需用處理，使其恢復正常體細胞染色體數。

【答案】（1）降低再分化生長素/細胞分裂素的比例不同

(2)水分、無機鹽

(3)根尖或莖尖無性繁殖AaBb

(4)單倍體高度不育秋水仙素

【分析】愈傷組織是指原植物體的局部受到創傷刺激后，在傷II表面新生的組織。它由

活的薄壁細胞組成，可起源于植物體任何器官內各種組織的活細胞。

【詳解】(1)［1］過程為脫分化處理，高度分化的植物細胞形成愈傷組織，細胞的分化

程度降低；［2］過程為愈傷組織的再分化過程；植物右不同階段需要的營養不同，脫分

化培養基、生根培養基和生芽培養基目的不同，因此生長素/細胞分裂素的比例不同。

(2)愈傷組織不能進行光合作用，在形成愈傷組織的過程中，細胞需要從外界獲得水

分、無機鹽和小分子有機物如氨基酸、錨萄糖等營養物質。

(3)根尖或莖尖處細胞分裂旺盛、感染病毒的概率小，常作為脫毒苗的首選；這種繁

殖方式不經過兩性細胞的結合，為無性繁殖；培養成的植株的基因型與原植株相同，為

AaBbo

(4)花粉為雄配子，配子發育來的為單倍體；水稻具有2個染色體組，該植株只有1

個染色體組，無同源染色體，減數分裂異常，因此高度不育；秋水仙素抑制紡錘體的形

成，會使染色體數目加藩，因此可使單倍體恢復為正常體細胞染色體數。

23.1型糖尿病的病因是胰島B細胞損傷，H型糖尿病多表現為對胰島素不敏感，不同

類型糖尿病臨床治療方案不同。抗胰島素抗體可快速檢測胰島素含量，為臨床診斷提供

依據。下圖為某科研小處制備抗胰島素單克隆抗體的流程。請回答下列問題：

陽性克隆提取單克

擴大培養隆抗體

陽性檢測

(1)實驗開始時需給實驗小鼠多次注射—，目的是—。經過免疫反應后提取出的B

淋巴細胞無法通過直接進行動物細胞培養獲得大量抗體，其原因是—。

(2)雜交瘤細胞的特點是一(答出兩點)。研究發現，細胞中DNA合成有，D和S兩

條途徑，氨基喋吟可以阻斷D途徑而不能阻斷S途徑。在HAT培養基(起選擇作我的

一種培養基)中加入氨基嚎吟后，未融合的親本細胞和同種細胞融合形成的細胞均因

DNA無法夏制而死亡，只有雜交瘤細胞能連續增殖。據此判斷雜交瘤細胞DNA合成存

在以上的—途徑。

（3）陽性克隆擴大培養常用有限稀釋法，即將專一抗體檢驗陽性的細胞稀釋到7?10個

/mL,每孔加入細胞稀釋液的體積為—mL（填“0.1”、“1”或“10”）,使每個孔內不多

于??個細胞，達到單克隆培養目的。

（4）成人隱匿性糖尿病（LADA）的病理進程比較緩慢，早期表現酷似II型糖尿病，后期

逐漸呈現I型糖尿病病征，LADA的臨床診斷，除了做必要的抗體和生化指標檢驗外，

還有一個標準是診斷后至少六個月不需要進行胰島素治療。據此推測該標準的設立依據

是一。

【答案】（1）胰島素為了獲得更多能夠產生特定抗體（抗胰島素抗體）的B

淋巴細胞淋巴細胞不能無限增殖而且壽命有限

（2）既能迅速大量繁殖，又能產生專一的抗體D和S

（3）0.1

（4）LADA早期胰島B細胞沒有受損（胰島素較充足），機體對胰島素不敏感且病理進程

比較緩慢

【分析】在制備單克隆抗體時，首先要給小鼠免疫，產生相應的漿細胞，然后將漿細胞

與骨髓瘤細胞融合，經過選擇培養基兩次篩選最后獲得能產生所需抗體的雜交瘤細也。

在單克隆抗體的制備過程中，使用了動物細胞培養和動物細胞融合等動物細胞工程技術。

【詳解】（1）在制備單克隆抗體時，首先要給小鼠多次免疫注射胰島素為，目的是為了

獲得更多能夠產生特定抗體（抗胰島素抗體）的B淋巴細胞。由于淋巴細胞不能無限增

殖而且壽命有限，經過免疫反應后提取出的B淋巴細胞無法通過直接進行動物細胞培養

獲得大量抗體。

（2）雜交瘤細胞的特點是既能迅速大量繁殖，又能產生專一的抗體。在HAT培養基（起

選擇作用的一種培養基）中加入家基喋吟后，未融合的親本細胞和同種細胞融合形成的

細胞均因DNA無法亞制而死亡，只有雜交瘤細胞能連續增殖，據此判斷雜交瘤細胞

DNA合成存在以上的D和S途徑。

（3）抗體檢驗陽性的細胞稀釋到7-10個/mL,每孔加入細胞稀釋液的體積為0.1mL,

使每個孔內不多于一個細胞，達到單克隆培養目的。

（4）由于LADA早期表現酷似II型糖尿病，后期逐漸呈現I型糖尿病病征，說明LADA

早期胰島B細胞沒有受損（胰島素較充足），機體對胰島素不敏感且病理進程比較緩慢，

因此LADA的臨床診斷，除了做必要的抗體和生化指標檢驗外，還有一個標準是診斷

后至少六個月不需要進行胰島素治療。

24.phb2蛋白具有抑制細胞增殖的作用。為初步探究某動物phb2蛋白抑制人宮頸瘴細

胞增殖的原因，研究者從基因數據庫中獲取了該蛋白的基因編碼序列（簡稱phb2基因）,

大小為0.9kb（lkb=1000堿基對），利用大腸桿菌表達該蛋白。下圖I是phb2基因編

碼區序列以及兩端需添加的能被相關酶識別的序列，圖2為研究所用表達載體示意圖,

表格為有關的限制的種類及識別序列和切割位點。回答下列問題。

限制酶種類SpelPvitIIBamHIXbal

識別序列3AleTAG13,3cAGICrG3'3GIGA1CC3'5'rjClAGA3'

啟

BaniHI動子

茲

節療

霉

素抗

曲龍基因編碼區?"終止子

性

基因

5'上云〒;二二：：：：：：：：亍徐*a鏈

復制原點

3?...：TACCGG-..............TTTACTj-0鏈

圖1圖2

（1）用PCR擴增phb2基因時，為了使PCR產物能被限制酶切割，以便構建基因表達載

體，可以考慮在引物的—（填“3,端”或“5端”）添加限制酶識別序列。據圖可推斷，擴

增a鏈時需添加的限制前識別序列以及所用引物的堿基序列是—（寫出12個堿基并

注明方向）。經過這兩種酶酶切的phb2基因和載體進行連接時，可選用—（填“E。

coliDN