CN119112794B 脂質體及其制備方法和在制備治療parp抑制劑抵抗乳腺癌的藥物中的應用 （廣州醫科大學附屬婦女兒童醫療中心）

脂質體及其制備方法和在制備治療PARP抑本發明提供了一種脂質體及其制備方法和在制備治療PARP抑制劑抵抗乳腺癌的藥物中的豆磷脂和膽固醇的乙醇溶液注入組氨酸水溶液程中發生了組氨酸代謝重編程，使得DNA合成修復得以維持。而采用本發明的脂質體處理PARPi2所述脂質體的制備方法包括：在攪拌條件下，將溶有大豆磷脂和膽固所述組氨酸水溶液的濃度為0.1_0.15m所述組氨酸水溶液和乙醇溶液的體積比為4所述水合的溫度為55_65℃;5.權利要求1_4任一項中所述的脂質體聯合PARP抑制劑在制備治療PARP抑制劑抵抗乳腺癌的藥物中的應用；3[0002]大約5％的乳腺癌患者存在BRCA腫瘤抑制基因突變或缺失，該基因通過同源重組缺乏癥與聚(ADP核糖)聚合酶(PARP)抑制劑(PARPi)治療之間的合成致死性相互作用被確ADP核糖的蛋白質共軛聚合物，這一過程被稱為PARylation。應用聚(ADP核糖)聚合酶[0003]而代謝重編程是癌細胞的一個標志。癌癥代謝組的關鍵[0008]本發明的第三目的在于提供上述脂質體在制備治療PARP抑制劑抵抗乳腺癌的藥4[0009]本發明的第四目的在于提供上述脂質體聯合PARP抑制劑在制備治療PARP抑制劑豆磷脂和膽固醇的乙醇溶液注入組氨酸水溶液中進行水合，水合結束后將乙醇組分揮發，5豆磷脂和膽固醇的乙醇溶液注入組氨酸水溶液中進行水合，水合結束后將乙醇組分揮發，6[0056]在一些可選的實施方式中，所述攪拌的轉速例如可以為，但不限于400r/min、7固醇溶于10ml乙醇中作為油相。將油相預熱至60℃,使用注射器將10ml油相勻速注入到溶于10ml乙醇中作為油相。將油相預熱至55℃,使用注射器將50ml油相勻速注入到20ml水醇溶于10ml乙醇中作為油相。將油相預熱至65℃,使用注射器將10ml油相勻速注入到10ml8顯示PARPi抵抗的細胞中19種氨基酸含量均顯著提高而唯獨組氨酸含量顯著下降。隨后構建了另一個PARPi抵抗株并在PARPi抵抗的病人標本中檢測組氨酸及其代謝中間產物的含代謝組測序以及轉錄組測序明確了乳腺癌PARPi抵抗過程中發生的氨基酸代謝重構并對其[0102]首先收集了經His脂質體和空脂質體處理的PDXR7和PDXR8細胞，并進行了必要的結果以及相對含量計算結果。結果顯示經His脂質體處理過的細胞，不管是PDXR7還是9藥PDXR細胞為實驗組，經空脂質體和Olaparib處理的為對照組；用低濃度組氨酸(0.05倍His)和Olaparib條件培養基處理的PARPi敏感PDXS細胞為實驗組，用正常濃度組氨酸(1倍His)和Olaparib處理的為對照組。將經不同處理的細胞添加到培養皿中的細胞培養基中，[0107]為了研究組氨酸代謝重編程在PARPi耐藥中的體內功能，將敏感和耐藥細胞皮下攜帶敏感癌細胞的小鼠被喂食添加低濃度組氨酸(低組氨酸組組氨酸的脂質體可用于治療PAPRi抵抗的乳修復是PARPi耐藥的主要機制。Rad51是功能性HR的生物標志物。用做FACS的Rad51抗體和丫H2A.X抗體分別對樣品進行處理，通過熒光活化細胞分選(FACS)分別對Rad51和丫使用DNA纖維測定法研究了對復制叉進展的影響。簡單地說，細胞在相應的培養基(含有