酵母菌的培養

回顧復習：（1）酵母菌

酵母菌是單細胞真核生物

酵母菌呼吸方式為兼性厭氧型 酵母菌生殖方式為出芽生殖、孢子生殖探究培養液中酵母菌數量的動態變化

（2）種群數量的變化?

種群數量的變化包括增長、波動、穩定、下降等?

“S”型曲線有一個K值，即環境容納量。?

種群數量的增長也受到許多環境因素（如溫度、培養液的pH、培養液的養分種類和濃度、代謝產物等）的影響。探究培養液中酵母菌數量的動態變化

1．實驗目的：（1）嘗試建構酵母菌種群增長的數學模型。（2）用數學模型解釋種群數量的變化。（3）學會使用血球計數板進行計數。2.實驗步驟： 1）培養基的配置 2）培養基滅菌 3）接種 4）酵母菌的培養28℃，連續培養7天 5）抽樣檢測計數 6）記錄并分析結果液體培養基

隨機取樣，多次計數，取平均值

如何計數？血球計數板構造：實物圖正面圖縱切面圖計數室，2個滴液處深度面積

血球計數板是一種專門用于計算較大單細胞微生物的一種儀器。一個特制的可在顯微鏡下觀察的玻片大方格中方格小方格計數室平臺上有九個大方格的方格網，中間大方格為計數室計數室放大計數室有兩種規格：一是分為16個中方格，每中方格中有25個小方格；另一種是分為25個中方格，每中方格有16個小方格。兩種都共有400個小方格。計數室計數時用25中格的計數板，要按對角線方位，取左上、左下、右上、右下、中央5個中格(即80小格)的酵母菌數。如果是16中格計數板,則只數四角上的四格酵母菌數（即100小格）。然后求出一個小方格的細胞平均數(N)放大放大對于壓在小方格界線上的酵母菌應取相鄰兩邊及頂角計數。c.從試管中吸出培養液進行計數之前，要將試管輕輕震蕩幾次，用滴管吸取少許，從計數板中間平臺兩側的溝槽內沿蓋玻片的下邊緣摘入一小滴（不宜過多，將計數室充滿即可），勿使氣泡產生，并用吸水紙吸去溝槽中流出的多余菌懸液。5）計數

a.視待測菌懸液濃度，以每小格的菌數可數為度。培養后期的樣液稀釋后再計數，加無菌水適當稀釋，如菌液不濃，可不必稀釋。b.取潔凈的血球計數板一塊，在計數區上蓋上一塊蓋玻片。d.靜置片刻（待細胞全部沉降到計數室底部），將血球計數板置載物臺上夾穩，先在低倍鏡下找到計數區后，再轉換高倍鏡觀察并計數.由于生活細胞的折光率和水的折光率相近，觀察時應減弱光照的強度。滴液處

e．一般選取計數室內四個角及中央五個中方格計數，若細胞位于小方格的線上，應遵循“數上線不數下線，數左線不數右線”的原則，以減少誤差。f.對于出芽的酵母菌，芽體達到母細胞大小一半時，即可作為兩個菌體計算。每個樣品計數應重復3次（每次數值不應相差過大，否則應重新操作），取其平均值,求出每一個小格中細胞平均數（N），按公式計算出每ml菌懸液所含酵母菌細胞數量。公式附后g.測數完畢，取下蓋玻片，用水將血球計數板沖洗干凈，切勿用硬物洗刷或抹擦，以免損壞網格刻度。洗凈后自行晾干或用吹風機吹干，放入盒內保存。6）記錄實驗結果每天同一時間，各組取出本組的試管，用血球計數板計數酵母菌個數，并作記錄，連續觀察7天。多次測量取平均值。減少誤差，力求準確。7）分析實驗結果，得出結論a、根據表格平均值作出培養液中酵母菌種群數量7天中的變化曲線。b、酵母菌種群數量隨時間呈_____型增長變化。S第4天第6天第1天死亡第7天此法計得的是活菌體和死菌體的總和每隔24小時取樣計數。(注意計數時間每天要固定)1、如果一個小方格內酵母菌過多，難以數清，應當采取怎樣的措施？無菌水稀釋后，再用血球計數板計數.2.討論：血球計數板上的誤差應如何減少，力求準確？多次測量取平均值。一個小組取同樣的菌液進行計數，取平均值。計算公式：A/5×25×B以一個大方格有25個中方格的計數板為例進行計算：假設五個中方格中總菌數為A，菌液稀釋倍數為B，那么，一個大方格中的總菌數（即0.1mm3中的總菌數）為：提示：1ml＝1cm3=1000mm31ml菌液總的總菌數為：＝A/5×25×B×10×1000＝50000A·B（個）如果計數板大方格中有16個中方格，四個中方格中總菌數為A，稀釋倍數為B,那么，又該如何計算呢鞏固練習在計算酵母菌個數的時候經常用到血球計數板，下列說法正確的是（）A.血球計數板只能對活細菌計數B.血球計數板每個計數室內的容積為1mm3C.血球計數板在滴加樣品的時候應該先滴加，后蓋蓋玻片D.遇酵母出芽，芽體大小達到母細胞的一半時，即作為兩個菌體計數0.1mm3？

在探究酵母菌種群數量變化時，酵母菌計數通常采用顯微鏡下觀察并用血球計數板計數的方法。血球計數板（見右圖）有16個中方格，每個中方格有25個小方格，小方格的邊長為Xmm，加蓋蓋玻片后的深度為Ymm。若顯微鏡下觀察一個小方格內的酵母菌數為A，則1mL培養液中酵母菌數為（1mL=1000mm3）

A．1000A/X2Y B．300A C．3×103A/X2Y D．AX2Y/1000取小量酵母菌液直接放入血球計數板直接計數,測得的數目是

A.活細胞數

B.死細胞數

C.菌落數

D.細胞總數

直接用血球計數板法無法區分死細胞和活細胞的,計得的是活菌體和死菌體的總和死亡在“探究培養液中酵母菌種群數量的變化”實驗中，某同學用顯微鏡觀察計數，統計發現血球計數板的小方格(2mm×2mm)內酵母菌數量的平均值為13個。假設蓋玻