雌二醇炔諾酮片H20020112

PAGE1PAGE5雌二醇炔諾酮片Ci’erchunQuenuotongPianEstradiolandNorethisteroneAcetateTablets本品為雌二醇和醋酸炔諾酮制成的復方制劑。含雌二醇(C18H24O2)和醋酸炔諾酮(C22H28O3)均應為標示量的92.5%-105.0%。[性狀]本品為白色薄膜衣片。[鑒別]（1）在含量測定項下記錄的色譜圖中，供試品各主峰的保留時間應與雌二醇和醋酸炔諾酮對照品峰的保留時間一致。（2）取本品2片，置10ml具塞離心管中，加水0.2ml，靜置15分鐘，使藥片充分浸濕，加無水乙醇4.0ml，振搖15分鐘，離心，取上層清液作為供試品溶液；另取雌二醇對照品適量，加無水乙醇溶解并稀釋成每1ml約含0.5mg的溶液作為對照溶液=1\*ROMANI；再取醋酸炔諾酮對照品適量，加無水乙醇溶解并稀釋成每1ml約含0.25mg的溶液作為對照溶液=2\*ROMANII。照薄層色譜法（中國藥典2000年版二部附錄VB）試驗，吸取上述三種溶液各2l，分別點于同一硅膠G薄層板上，以丙酮-氯仿（1：9）為展開劑，展開后，晾干，然后在100C干燥15分鐘，放冷置室溫，噴以5%硫酸乙醇溶液，在100C加熱薄層板直至其顯色，再在紫外光燈（365nm）下檢視。供試品溶液所顯主斑點的顏色與位置應分別與對照溶液=1\*ROMANI、=2\*ROMANII的主斑點相同。[檢查]含量均勻度取本品1片，置100ml具塞錐形瓶中，精密加50%乙醇溶液50ml,磁力攪拌1小時，用0.45m濾膜過濾，取續濾液作為供試品溶液。照含量測定項下的方法測定并計算出每片的含量，應符合規定（中國藥典2000年版二部附錄XE）。溶出度照高效液相色譜法（中國藥典2000年版二部附錄VD）測定。色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以水-80%乙腈（31：69）為流動相，檢測波長280nm（測定雌二醇）、241nm（測定醋酸炔諾酮），流速1ml/min。理論板數按雌二醇峰計算應不低于3000。測定法取本品，照溶出度測定法（中國藥典2000年版二部附錄XC第二法）測定，以0.3%十二烷基硫酸鈉500ml為溶劑，轉速為每分鐘100轉，依法操作，經30分鐘時，取溶液適量，用0.45m濾膜過濾，取續濾液作為供試品溶液；另精密量取含量測定項下的雌二醇對照品儲備液和醋酸炔諾酮對照品儲備液各1.0ml置100ml量瓶中，加0.3%十二烷基硫酸鈉溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。精密量取上述對照品溶液和供試品溶液各100l，分別注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標法以峰面積計算出每片中雌二醇和醋酸炔諾酮的溶出量。雌二醇的限度為標示量的80%，醋酸炔諾酮的限度為標示量的85%，應符合規定。有關物質照高效液相色譜法（中國藥典2000年版二部附錄VD）測定。色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,以溶劑A和溶劑B為流動相進行梯度洗脫，檢測波長235nm（測定雌二醇的有關物質）、254nm（測定醋酸炔諾酮的有關物質），流速0.8ml/min。進樣體積100l，運行時間60分鐘，用系統適用性溶液注[1]在254nm測定6羥基-醋酸炔諾酮和雌二醇的分離度，應大于1.0，雌二醇的保留時間應控制在22-25分鐘。洗脫程序如下表：洗脫程序時間溶劑A溶劑B0分鐘80%20%2分鐘65%35%35分鐘20%80%49分鐘20%80%50分鐘80%20%60分鐘80%20%溶劑A：0.5%四氫呋喃的水溶液。溶劑B：0.5%四氫呋喃的80%乙腈溶液。供試品溶液的制備：取本品12片，置100ml具塞錐形瓶中，精密加50%乙醇溶液50ml,磁力攪拌3小時，用0.45m濾膜過濾，取續濾液作為供試品溶液；對照溶液的制備：精密量取供試品溶液1.0ml置100ml量瓶中，用50%乙醇稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。測定法精密量取對照溶液100l注入液相色譜儀，調節儀器的靈敏度使主峰達到滿量程的25%。再精密量取供試品溶液和對照溶液各100l，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，計算樣品中各雜質的含量。與雌二醇相關的單個雜質峰面積的校正值不得大于對照溶液的主峰面積（1.0%）,總雜質峰面積的校正值不得大于對照溶液的主峰面積的2倍(2.0%)；與醋酸炔諾酮相關的單個雜質峰面積的校正值不得大于對照溶液的主峰面積（1.0%）,總雜質峰面積的校正值不得大于對照溶液的主峰面積的2倍(2.0%)。[注2-4]干燥失重取本品10片研細，精密稱取細粉0.3g，60C減壓干燥3小時，減失重量不得過7.5%微生物限度取本品10g（取自3盒）加滅菌生理鹽水100ml制成1：100均勻混懸液，按中國藥典2000年版二部附錄XIJ依法檢驗，細菌計數不得過1000個/g；霉菌計數不得過100個/g；大腸桿菌：1g中不得檢出。其他應符合片劑項下有關的各項規定（中國藥典2000年版二部附錄IA）。[含量測定]照高效液相色譜法（中國藥典2000年版二部附錄VD）測定。色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以水-80%乙腈（31：69）為流動相，檢測波長280nm（測定雌二醇）、254nm（測定醋酸炔諾酮），流速1ml/min。雌二醇與雌酮的分離度應大于2.0，理論板數按雌二醇峰計算應不低于3000。預試液的制備與測定精密稱取雌酮對照品6mg置200ml量瓶中，加無水乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為雌酮對照品儲備液；精密量取含量測定項下的雌二醇對照品儲備液和醋酸炔諾酮對照品儲備液各1.0ml置10ml量瓶中，加雌酮對照品儲備液1.0ml，加50%乙醇溶液稀釋至刻度，搖勻，即得。精密量取50l，注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，計算雌二醇與雌酮的分離度，應大于2.0。對照品溶液的制備精密稱取雌二醇對照品20mg置100ml量瓶中，加無水乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為雌二醇對照品儲備液；另精密稱取醋酸炔諾酮對照品10mg置100ml量瓶中，加無水乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為醋酸炔諾酮對照品儲備液；分別精密量取雌二醇對照品儲備液1.0ml、醋酸炔諾酮對照品儲備液1.0ml置10ml量瓶中，加50%乙醇溶液稀釋至刻度，搖勻，即得。供試品溶液的制備取本品12片，置100ml具塞錐形瓶中，精密加50%乙醇溶液50ml,磁力攪拌3小時，用0.45m濾膜過濾，精密量取續濾液2.0ml置25ml量瓶中，加50%乙醇溶液稀釋至刻度，搖勻，即得。測定法精密量取上述對照品溶液和供試品溶液各50l，分別注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標法以峰面積計算雌二醇和醋酸炔諾酮的含量。附各雜質相對于各自主峰的相對保留時間（RRt）雜質名稱廠方提供RRt實際測定RRt6-羥基-雌二醇0.490.486-羥基-雌二醇0.530.516-酮基-雌二醇0.640.6216-酮基-雌二醇0.660.656-酮基-雌酮0.790.77-Equilenol0.890.886-脫氫-雌二醇0.950.95-雌二醇1.051.06雌酮1.161.174-甲基-雌二醇1.231.256-羥基-醋酸炔諾酮0.580.583,20-二酮-醋酸炔諾酮0.880.90炔諾酮0.660.64醋酸炔諾酮1.01.0雌二醇1.01.0[注2]在235nm檢測雌二醇的相關物質，除了6羥基-醋酸炔諾酮外，各雜質均在6分鐘到29分鐘（4-甲基-雌二醇）之間出峰。在254nm檢測醋酸炔諾酮的相關物質，除了雌二醇、-雌二醇和4-甲基-雌二醇峰外，各雜質均在29分鐘到56分鐘之間出峰，但計算雜質時應加上較早出峰的6羥基-醋酸炔諾酮。[注3]用系統適用性溶液有助于鑒別已知的雜質，除了這些雜質外，與醋酸炔諾酮相關的下列雜質未包括在上述系統適用性溶液中，而是給出了它們的相對保留時間和校正因子：6-酮基-醋酸炔諾酮RRt=0.80，f=1.8；6-脫氫-醋酸炔諾酮RRt=0.97，f=2.2。與雌二醇相關的-Equilenol的校正因子f=0.04，因此在計算這三種雜質的含量時應乘以校正因子。[注4]峰面積小于或等于主峰面積0.1%的峰被認為是基線波動造成的，