環(huán)境監(jiān)測實(shí)驗(yàn) 課件 實(shí)驗(yàn)二 紫外-可見光分光光度法測定水中有機(jī)物吸收光譜

紫外-可見光分光光度法測定水中有機(jī)物吸收光譜實(shí)驗(yàn)二指導(dǎo)教師：01實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c原理02實(shí)驗(yàn)裝置與步驟03數(shù)據(jù)記錄與分析04注意事項(xiàng)與思考題目錄一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c原理了解實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蜏y定原理明確實(shí)驗(yàn)要達(dá)成的目標(biāo)01掌握測定原理方法掌握紫外-可見光分光光度法測定有機(jī)物吸收光譜的原理和方法。02熟練操作儀器熟練掌握紫外-可見光分光光度計(jì)的操作與使用。03學(xué)會繪制曲線分析學(xué)會繪制有機(jī)物吸收光譜曲線和標(biāo)準(zhǔn)曲線圖，并進(jìn)行定量分析。實(shí)驗(yàn)?zāi)康睦斫鈱?shí)驗(yàn)背后的科學(xué)原理有機(jī)物的吸收特性有機(jī)化合物對特定波長光線有吸收特性，可掃描測定最大吸收光譜。1紫外-可見光吸收光譜研究物質(zhì)在200-800nm區(qū)分子吸收光譜，屬于電子光譜。2電子躍遷產(chǎn)生光譜有機(jī)物不飽和鍵吸收特定光，產(chǎn)生電子躍遷形成吸收光譜。3定性分析依據(jù)定性分析根據(jù)吸收光譜圖上最大吸收波長、強(qiáng)度和吸收系數(shù)。4定量分析依據(jù)定量分析根據(jù)Beer定律，吸光度與濃度、光程長度有關(guān)。5實(shí)驗(yàn)原理二、實(shí)驗(yàn)裝置與步驟熟悉實(shí)驗(yàn)所需設(shè)備和操作流程了解實(shí)驗(yàn)所需儀器和試劑包括紫外-可見光分光光度計(jì)、電子天平、比色皿等。01儀器有鄰苯二甲酸氫鉀、藏紅T、甲基藍(lán)標(biāo)準(zhǔn)儲備液和超純水。02試劑如容量瓶、移液管、玻璃棒、燒杯等常用玻璃器皿。03其他玻璃器皿實(shí)驗(yàn)裝置與試劑按照步驟進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作配制不同濃度鄰苯二甲酸氫鉀、藏紅T、甲基藍(lán)標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。標(biāo)準(zhǔn)溶液配制1220nm處測透光率，偏差小于0.5%的比色皿可使用并記錄校正值。比色皿配套性檢查2選標(biāo)準(zhǔn)溶液，200-600nm范圍繪制吸收曲線，確定特征波長。有機(jī)物定性分析3特征波長處測標(biāo)準(zhǔn)溶液吸光度，以濃度和吸光度為坐標(biāo)繪制曲線。標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制4選未知樣，測吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算未知樣濃度。有機(jī)物定量分析5實(shí)驗(yàn)步驟三、數(shù)據(jù)記錄與分析記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)并進(jìn)行科學(xué)分析準(zhǔn)確記錄實(shí)驗(yàn)相關(guān)數(shù)據(jù)記錄各濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算回歸方程。標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)據(jù)1多次測定未知樣吸光度，計(jì)算濃度、平均值、誤差和標(biāo)準(zhǔn)偏差。未知樣數(shù)據(jù)分析2數(shù)據(jù)記錄根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)據(jù)，計(jì)算回歸方程和相關(guān)系數(shù)。計(jì)算回歸方程01依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程，計(jì)算未知樣中有機(jī)物濃度。計(jì)算未知樣濃度02按公式計(jì)算實(shí)驗(yàn)的相對誤差和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。計(jì)算誤差與標(biāo)準(zhǔn)偏差03對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)誤差產(chǎn)生的原因進(jìn)行分析。分析誤差原因04對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析數(shù)據(jù)分析四、注意事項(xiàng)與思考題明確實(shí)驗(yàn)注意要點(diǎn)并思考相關(guān)問題實(shí)驗(yàn)過程中需要注意的事項(xiàng)儀器防水防潮注意紫外-可見光分光光度計(jì)的儀器防水與防潮。1比色皿使用石英比色皿易碎，要輕拿輕放，使用前檢查配套性并調(diào)零。2溶液使用標(biāo)準(zhǔn)溶液現(xiàn)配現(xiàn)用，未知樣品均勻混合避免沉淀。3佩戴手套實(shí)驗(yàn)過程中盡量佩戴手套，避免接觸化學(xué)品。45更換波長模式校零每次更換波長或模式時，需重新?；€或校零。注意事項(xiàng)對實(shí)驗(yàn)內(nèi)容進(jìn)行深入思考適用有機(jī)物類型思考紫外-可見光分光光度法適用于哪些類型的有機(jī)物及原因。01特征波長選擇